產(chǎn)品名稱：人胰腺癌細(xì)胞HPAF2
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人胰腺癌細(xì)胞HPAF2收到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人胰腺癌細(xì)胞HPAF2操作步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人胰腺癌細(xì)胞HPAF2部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS3112 PG 人巨細(xì)胞肺癌細(xì)胞PG
YS3113 MAC1 人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞MAC1
YS3114 HSKMC 人骨骼肌細(xì)胞HSKMC
YS3115 LWRN 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞LWRN
YS3116 IFRS1 大鼠雪旺細(xì)胞IFRS1
YS3117 S37 小鼠肉瘤細(xì)胞S37
YS3118 ZYMSVEC01 豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞ZYMSVEC01
YS3119 SCC154 人舌鱗癌細(xì)胞SCC154
YS3120 CG4 大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞CG4
YS3121 T98 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞T98
YS3122 MA782 小鼠乳腺癌細(xì)胞MA782
YS3123 SR786 人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞SR786
YS3124 HEML 人表皮黑色素細(xì)胞HEML
YS3125 Co115 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞Co115
YS3126 KP2 人胰腺癌細(xì)胞KP2
YS3127 hRPTC 人近端腎小管上皮細(xì)胞hRPTC
YS3128 COLO829 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞COLO829
YS3129 CaES17 人食管癌細(xì)胞CaES17
YS3130 SEG1 人食管腺癌細(xì)胞SEG1
YS3131 OVCAR5 人卵巢癌細(xì)胞OVCAR5
YS3132 ACCM 人涎腺癌細(xì)胞ACCM
YS3133 UMUC14 人腎癌細(xì)胞UMUC14
YS3134 CNE2Z 人鼻咽癌細(xì)胞CNE2Z
YS3135 MIMVEC 小鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞MIMVEC
YS3136 MUSM1 小鼠小腸平滑肌細(xì)胞MUSM1
YS3137 SNU354 人肝癌細(xì)胞SNU354
YS3138 HUCEC 人正常宮頸上皮細(xì)胞HUCEC
YS3139 C57B6L 小鼠肺成纖維細(xì)胞C57B6L
YS3140 hgf HGF人牙齦成纖維細(xì)胞
YS3141 hepg2/LUC 人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記HepG2/LUC
YS3142 hmscbm 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞/HMSC-bM
YS3143 u251/LUC 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞帶熒光素酶U251/LUC
YS3144 mc38/LUC/GFP 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞標(biāo)記MC38/LUC/GFP
更多細(xì)胞請咨詢我們：人胰腺癌細(xì)胞HPAF2
關(guān)鍵字： 人胰腺癌細(xì)胞HPAF2;HPAF2;人胰腺癌細(xì)胞;ATCC代購;ATCC引種;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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