產(chǎn)品名稱(chēng):人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10F
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001) |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過(guò)渡培養(yǎng) |
人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10F收到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開(kāi)外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀(guān)察:未超過(guò)80%匯合度時(shí),可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話(huà),放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)
人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10F培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS:若客戶(hù)收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過(guò)80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。
三、細(xì)胞凍存:(注:無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào):C7001)
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀(guān)察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃
人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10F部分產(chǎn)品:
YS3561 cjm CJM
YS3562 clonem3s91 CloneM-3(S91)
YS3563 cls54 CLS-54
YS3564 cmk115 CMK-11-5
YS3565 cmk86 CMK-86
YS3566 cocm1 CoCM-1
YS3567 colo206f COLO206F
YS3568 colo320dmf COLO320DMF
YS3569 colo668 COLO668
YS3570 colo679 COLO679
YS3571 colo684 COLO684
YS3572 colo741 COLO741
YS3573 colo792 COLO792
YS3574 colo60h COLO-60H
YS3575 colo94h COLO-94H
YS3576 corl105 COR-L105
YS3577 corl23cpr COR-L23/CPR
YS3578 corl23r COR-L23/R
YS3579 corl47 COR-L47
YS3580 corl88 COR-L88
YS3581 corl95 COR-L95
YS3582 cov504 COV504
YS3583 cov644 COV644
YS3584 ctb1 CTB-1
YS3585 delta47 Delta-47
YS3586 dms273 DMS273
YS3587 dms454 DMS454
YS3588 dv90 DV-90
YS3589 eb1 EB1
YS3590 eb2 EB2
YS3591 ecgi10 EC-GI-10
YS3592 f36p F-36P
YS3593 f4nmel F4N(MEL)
YS3594 f98egfr F98EGFR
YS3595 f98npegfrviii F98npEGFRvIII
YS3596 fak FAK++
YS3597 fao Fao
YS3598 fm3a FM3A
YS3599 /Furpnt2 /Fu-RPNT-2
YS3600 g292clonea141b1 G-292cloneA141B1
YS3601 ga10 GA-10
YS3602 gak GAK
YS3603 gb1 GB-1
YS3604 gi1 GI-1
YS3605 gm04281c GM04281C
YS3606 gm09197c GM09197C
YS3607 gm12580 GM12580
YS3608 gm12611 GM12611
YS3609 gm15850 GM15850
YS3610 gm2005 GM2005
YS3611 gm20942 GM20942
更多細(xì)胞請(qǐng)咨詢(xún)我們:人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10F
關(guān)鍵字: 人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10F;MCF-10F;人正常乳腺上皮細(xì)胞;ATCC引種;ATCC代購(gòu);
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶(hù)厚愛(ài),本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅(jiān)持以?xún)?yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí),也建立了一套集技術(shù)支持,物流售后服務(wù)等多部門(mén)聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶(hù),雅吉生物的試劑盒,在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,深受廣大科研人員好評(píng),先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
本公司鄭重承諾:質(zhì)量保證、供貨及時(shí)、服務(wù)周到。