包裝規(guī)格:
Biotin-Protein Ligase ( 1mg/ml)
700 μl×4 vials
10×Biotin Ligase Buffer A
10 ml
10×Biotin Ligase Buffer B
10 ml
儲存條件:-80℃密閉保存一年有效,低溫運(yùn)輸。
產(chǎn)品概述
生物素連接酶 (Biotin Ligase、BirA、EC 6.3.4.15)能活化生物素形成生物素酰 -5'-腺苷酸,將生物素特異地轉(zhuǎn)
移到生物素受體蛋白(如 AviTag 融合蛋白)上,使蛋白生物素化。
來源:
重組蛋白(Escherichia coli)
活性及純度
Biotin-Protein Ligase 生物活性≥7,500 Units/μg
純度>95% ,無可檢測的蛋白酶活性。
酶活性單位定義
底物蛋白(多肽)濃度為 40 μM 的條件下,于 25℃孵育 12-16小時 ,將 1 pmol 蛋白(多肽)生物素化所需
的酶 量定義為一個活性單位。
儲存條件
1. 干冰運(yùn)送,解凍后分裝,避免反復(fù)凍融;
2. Biotin-Protein Ligase 長期保存置于-80℃ , 短期內(nèi)使用置于-20℃ , 頻繁使用可短時置于4℃。在4℃條件下
保存三個月可保持>90% 的酶活性;
3. Ligase Buffer A、B 儲存于-20℃, 可反復(fù)凍融。
反應(yīng)體系示例
反應(yīng)物組成
體積
10×Biotin Ligase Buffer A
2.5 μl
10×Biotin Ligase Buffer B
2.5 μl
Biotin Ligase
0.17 μl
蛋白(多肽)底物
1-5 ug
dH2O(滅菌蒸餾水)
up to 25 μl
總體積 25 μl,于 25℃孵育 12-16小時,使底物完全生物素化。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品的底物為 AviTag 融合蛋白。
2. 如底物蛋白(多肽)需保存在較低溫度時,可適當(dāng)降低反應(yīng)溫度并應(yīng)延長酶促反應(yīng)時間。
3. 氯化鈉(>100 mM)、甘油(>5% W/V)、硫酸銨(>50 mM)等許多常見的緩沖液成分會抑制生物素連接酶的活性。
4. 底物中可含有 Tris(pH 8.0) , 濃度為 10 mM,不超過 50 mM。
該產(chǎn)品 于實(shí)驗(yàn)科學(xué)研究用,若有任何單位或個人將該產(chǎn)品用于臨床診斷、 等其他國家專門規(guī)定的特殊用途,本公司概不承擔(dān)任何責(zé)任
關(guān)鍵字： 生物素;連接酶;Biotin Ligase BirA;
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