產(chǎn)品名稱：人黑色素瘤細胞M21
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人黑色素瘤細胞M21收到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人黑色素瘤細胞M21培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人黑色素瘤細胞M21部分相關(guān)細胞如下：
YS2603 HFTF 人胚胎眼Tenon＇s囊成纖維細胞HFTF
YS2604 MSC 豬骨髓間質(zhì)干細胞MSC
YS2605 Ratpodocyte 大鼠腎足細胞Ratpodocyte
YS2606 HCM 人心肌細胞HCM
YS2607 Malme3M 人惡性黑色素瘤細胞Malme3M
YS2608 HCV29 人膀胱上皮細胞HCV29
YS2609 HOPC 人少突膠質(zhì)前體細胞HOPC
YS2610 KM12 人結(jié)腸癌細胞KM12
YS2611 HMVEC 人微血管內(nèi)皮細胞HMVEC
YS2612 KYSE270 人食管鱗癌細胞KYSE270
YS2613 Nb2 大鼠淋巴瘤細胞Nb2
YS2614 MSCs 小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞MSCs
YS2615 HFLS 人滑膜成纖維細胞HFLS
YS2616 HepaRG 人肝癌細胞HepaRG
YS2617 HUASMC 人臍動脈平滑肌細胞HUASMC
YS2618 rHSC99 大鼠肝星狀細胞rHSC99
YS2619 MPC83 小鼠胰腺腺泡細胞MPC83
YS2620 MNFS60 小鼠髓性白血病細胞MNFS60
YS2621 RIMEC 鼠腸粘膜微血管內(nèi)皮細胞RIMEC
YS2622 U138MG 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞U138MG
YS2623 LAN1 人神經(jīng)母細胞瘤細胞LAN1
YS2624 G361 人黑色素瘤細胞G361
YS2625 M21 人黑色素瘤細胞M21
YS2626 MDCCMSB1 雞淋巴瘤細胞MDCCMSB1
YS2627 TFH 濾泡性輔助性T細胞TFH
YS2628 GCT0404 人骨巨細胞瘤細胞GCT0404
YS2629 BMUS1 牦牛皮膚細胞BMUS1
YS2630 Myla2059 人皮膚T淋巴細胞瘤細胞Myla2059
YS2631 RMC1 大鼠視網(wǎng)膜Muller細胞RMC1
YS2632 NF639 小鼠乳腺癌細胞NF639
YS2633 TEC 人胸腺上皮細胞TEC
YS2634 LP1 人多發(fā)性骨髓瘤細胞LP1
YS2635 PAEC 雞動脈內(nèi)皮細胞PAEC
YS2636 CMECs 大鼠心肌微血管內(nèi)皮細胞CMECs
YS2637 LA4 鼠肺癌細胞LA4
YS2638 RAMSCs 大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞RAMSCs
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽”的精神，堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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