產(chǎn)品名稱：人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2085 OCIAML3 人急性骨髓性白血病細(xì)胞OCIAML3
YS2086 ARH77 人外周血淋巴細(xì)胞ARH77
YS2087 BC3 人胸膜積液B淋巴細(xì)胞BC3
YS2088 CFPAC1 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞CFPAC1
YS2089 KATOⅢ 人胃腺癌細(xì)胞KATOⅢ
YS2090 KHOS240S 人骨肉瘤細(xì)胞KHOS240S
YS2091 SJSA1 人骨肉瘤細(xì)胞SJSA1
YS2092 A9 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株A9
YS2093 BT 牛鼻甲骨細(xì)胞BT
YS2094 LNCaP 人前列腺癌細(xì)胞LNCaP
YS2095 HCCLM3 人肝癌細(xì)胞HCCLM3
YS2096 EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞EAC
YS2097 Hifive(BTITn5B14) 昆蟲細(xì)胞Hifive(BTITn5B14)
YS2098 SDM 昆蟲細(xì)胞SDM
YS2099 BGE1L15B 昆蟲細(xì)胞BGE1L15B
YS2100 JVM2 人外周淋巴細(xì)胞（EB病毒感染）JVM2
YS2101 2BS 人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS
YS2102 CCRFSB 人外周血淋巴細(xì)胞CCRFSB
YS2103 M210B4 小鼠骨髓纖維原細(xì)胞M210B4
YS2104 NCIH441 人肺腺癌細(xì)胞NCIH441
YS2105 RBL1 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞RBL1
YS2106 U14/GFP 小鼠子宮頸癌細(xì)胞（/GFP標(biāo)記）U14/GFP
YS2107 LTEPs 人肺鱗癌細(xì)胞LTEPs
YS2108 NCTCclone1469 小鼠正常肝細(xì)胞NCTCclone1469
YS2109 CRFK 貓腎細(xì)胞CRFK
YS2110 MCCAR 人外周血淋巴細(xì)胞MCCAR
YS2111 PLA801D95D 人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞PLA801D95D
YS2112 2B4 人前列腺癌細(xì)胞2B4
YS2113 PGBE1 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移系PGBE1
YS2114 HeLa229 人宮頸癌細(xì)胞HeLa229
YS2115 hEM15A 人子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞hEM15A
YS2116 BV173 人白血病細(xì)胞BV173
YS2117 SK6 豬腎細(xì)胞SK6
YS2118 RH30 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞RH30
YS2119 TCYIK 人宮頸小細(xì)胞癌細(xì)胞TCYIK
YS2120 Hs68 人男性正常龜頭細(xì)胞Hs68
YS2121 MV3 人黑色素瘤細(xì)胞MV3
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關(guān)鍵字： 人二倍體細(xì)胞/人胚肺成纖維細(xì)胞2BS;人二倍體細(xì)胞/;2BS;ATCC代購(gòu);ATCC引種;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神，堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶，雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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