中文名：重組高熱穩(wěn)定DNA 聚合酶
英文名：Taq DNA Polymerase
貨號：T295106
包裝：1kit
存儲溫度：-20°C儲存
產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品簡介
本品是94 kDa的耐熱性DNA聚合酶，通過將Thermus aquaticus DNA Polymerase的基因經(jīng)克隆轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中進行表達后，分離提取而得到的，與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。具有5'→ 3'聚合酶活性和5'→ 3'外切酶活性，但無3'→ 5'外切酶活性。PCR產(chǎn)物的3'端帶A，可克隆至T載體。
產(chǎn)品組成
使用方法
1.建議的 qPCR 反應(yīng)體系
| 試劑 | 使用量 | 終濃度 |
Taq Plus DNA Polymerase (5 U/μl)
| 0.25 μl?
| 1.25 U/50 μl
|
10×Taq Buffer for PCR
| 5 μl
| 1×
|
dNTP（10 mM）
| 1 μl
| 0.2 mM
|
正向引物（10 μM）
| 1 μl
| 0.2 μM
|
反向引物（10 μM）
| 1 μl
| 0.2 μM
|
模板 DNAa
| X μl
|
|
ddH2O
| To 50 μl
|
|
a. 不同模板最佳反應(yīng)濃度有所不同，以 50 μl 體系為例：模板為基因組 DNA 時，一般使用量應(yīng)在 10~400 ng；當模板為質(zhì)?；虿《?DNA 時，一般使用量應(yīng)在10 pg~20 ng。
2. 常規(guī) PCR 反應(yīng)程序
a. 該預(yù)變性條件適合絕大多數(shù)擴增反應(yīng)，對于一些復(fù)雜模板，例如：菌液、菌落（尤 其是酵母）的 PCR 擴增，預(yù)變性時間可適當延長至 10 min，以提高預(yù)變性效果。
注 : 如果使用酵母菌液作為 PCR 擴增模板，建議目的片段長度不超過 2.5 kb，若 超出 2.5 kb, 建議將酵母菌液預(yù)先進行破壁處理。
質(zhì)量控制
a.核酸內(nèi)切酶殘留檢測：將酶液與超螺旋質(zhì)粒 DNA 在 37℃ 溫育 4 h，通過 DNA 電泳檢測質(zhì)粒無變化。
b.核酸外切酶殘留檢測：將酶液與雙鏈 DNA 底物在 37℃ 溫育 16 h，通過 DNA 電泳檢測雙鏈 DNA 底物無變化。
c.宿主殘留檢測：將酶液中殘留的核酸經(jīng) E.coli 16S rDNA 特異性的 TaqManqPCR 檢測，E.coli 基因組殘留低于 10 拷貝。
d.功能檢測：能有效擴增多種基因組中的單拷貝基因。
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關(guān)鍵字： 重組高熱穩(wěn)定DNA 聚合酶;Taq DNA Polymerase
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