中文名：2×常規(guī)PCR預混液（含染料）
英文名：Taq-Plus PCR Forest Mix (2x)
純度：2×
貨號：T295088
包裝：1ml、5ml、5ml
存儲溫度：-20°C儲存
產品介紹：
產品簡介
Taq-Plus PCR Forest Mix (2x) 的濃度為 2×，使用方便快捷，能減少 PCR 操作過程中的污染，使用時只需取適量 Taq-Plus PCR Forest Mix (2x)， 加入模板和引物，并加入 ddH2O 補足體積，使反應體系濃度為 1× 即 可進行 PCR 反應。 該 Mix 最長可擴增 5 kb DNA 片段，具有良好的擴增特異性和模 板兼容性，PCR 產物 3' 端帶 A 堿基，純化后可直接用于 T/A 克隆。 PCR Mix 中包含兩種染料，PCR 產物無需添加 Loading Buffer 可直 接點樣電泳，且電泳過程中會出現(xiàn)兩個指示條帶。該染料不影響 PCR 擴增效率，但對于需要對 PCR 產物進行吸光度、熒光等光學分析的 實驗，建議在分析前對 PCR 產物進行純化，或使用無染料的 Taq-Plus PCR Master Mix (2x) 。
使用方法
1. 常規(guī) PCR 反應體系
a. 引物推薦終濃度為 0.2~0.4 μM，效果不佳時可以在 0.1~1 μM 濃度范圍內進
行調整；
b. 不同模板最佳反應濃度有所不同，以 50 μl 體系為例：模板為基因組 DNA 時，
一般推薦的使用量為 10~400 ng；當模板為質?；虿《?DNA 時，一般推薦的
使用量為 10 pg~20 ng。
2. 常規(guī) PCR 反應程序
a. 該預變性條件適合絕大多數擴增反應，對于一些復雜模板，例如：菌液、菌落（尤 其是酵母）的 PCR 擴增，預變性時間可適當延長至 10 min，以提高預變性效果；
b. 關于延伸速率，當目的片段長度不超過 2 kb 時，推薦使用 30 sec/kb；當目的片段長度大于 2 kb 時，推薦使用 60 sec/kb。
注 : 如果使用酵母菌液作為 PCR 擴增模板，建議目的片段長度不超過 2.5 kb，若超出 2.5 kb, 建議將酵母菌液預先進行破壁處理。
3. 凝膠濃度對應的染料遷移距離
注：染料會影響吸光度。
質量控制 核酸內切酶殘留檢測 將酶液與超螺旋質粒 DNA 在 37℃溫育 4 h，通過 DNA 電泳檢測 質粒無變化。 核酸外切酶殘留檢測 將酶液與雙鏈 DNA 底物在 37℃溫育 16 h，通過 DNA 電泳檢測 雙鏈 DNA 底物無變化。 穩(wěn)定性測試 室溫存放一周，無明顯活性改變。 功能檢測 以質粒 DNA 和人基因組 DNA 為模板，擴增 5k 和 3k 兩個片段，30 個循環(huán)后經瓊脂糖凝膠電泳檢測可見目的條帶。
質量控制
核酸內切酶殘留檢測：
將酶液與超螺旋質粒 DNA 在 37℃溫育 4 h，通過 DNA 電泳檢測質粒無變化。
核酸外切酶殘留檢測：將酶液與雙鏈 DNA 底物在 37℃溫育 16 h，通過 DNA 電泳檢測雙鏈 DNA 底物無變化。
穩(wěn)定性測試：室溫存放一周，無明顯活性改變。
功能檢測：以質粒 DNA 和人基因組 DNA 為模板，擴增 5k 和 3k 兩個片段， 30 個循環(huán)后經瓊脂糖凝膠電泳檢測可見目的條帶。
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關鍵字： 2×常規(guī)PCR預混液（含染料）;Taq-Plus PCR Forest Mix (2x)
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