中文名：2×常規(guī)PCR預(yù)混液
英文名：Taq-Plus PCR Master Mix (2x)
純度：2×
貨號：T295072
包裝：1ml、5ml、5ml
存儲溫度：-20°C儲存
產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品簡介
Taq-Plus PCR Master Mix (2x) 的濃度為 2×，使用方便快捷，能減少 PCR 操作過程中的污染，使用時只需取適量 Taq-Plus PCR Master Mix (2x)，加入模板和引物，并加入 ddH2O 補足體積，使反應(yīng)體系濃度為 1× 即可進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。 該 Mix 最長可擴增 5 kb DNA 片段，具有良好的擴增特異性和模 板兼容性，PCR 產(chǎn)物 3' 端帶 A 堿基，純化后可直接用于 T/A 克隆。
使用方法
1. 常規(guī) PCR 反應(yīng)體系
a. 引物推薦終濃度為0.2~0.4μM，效果不佳時可以在0.1~1μM 濃度范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整；
b. 不同模板最佳反應(yīng)濃度有所不同，以 50μl體系為例：模板為基因組 DNA 時， 一般推薦的使用量為10~400ng；當(dāng)模板為質(zhì)粒或病毒DNA時，一般推薦的使用量為
10pg~20ng。
2. 常規(guī) PCR 反應(yīng)程序
a. 該預(yù)變性條件適合絕大多數(shù)擴增反應(yīng)，對于一些復(fù)雜模板，例如：菌液、菌落（尤其是酵母）的PCR 擴增，預(yù)變性時間可適當(dāng)延長至10 min，以提高預(yù)變性效果；
b. 關(guān)于延伸速率，當(dāng)目的片段長度不超過 2 kb 時，推薦使用30 sec/kb；當(dāng)目的片段長度大于 2 kb 時，推薦使用 60 sec/kb。
注 :
如果使用酵母菌液作為 PCR 擴增模板，建議目的片段長度不超過 2.5 kb，若
超出 2.5 kb, 建議將酵母菌液預(yù)先進(jìn)行破壁處理。
質(zhì)量控制
核酸內(nèi)切酶殘留檢測：將酶液與超螺旋質(zhì)粒 DNA 在 37℃溫育 4 h，通過 DNA 電泳檢測質(zhì)粒無變化。
核酸外切酶殘留檢測：將酶液與雙鏈 DNA 底物在 37℃溫育 16 h，通過 DNA 電泳檢測雙鏈 DNA 底物無變化。
穩(wěn)定性測試：室溫存放一周，無明顯活性改變。
功能檢測：以質(zhì)粒 DNA 和人基因組 DNA 為模板，擴增 5k 和 3k 兩個片段， 30 個循環(huán)后經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測可見目的條帶。
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關(guān)鍵字： 2×常規(guī)PCR預(yù)混液;Taq-Plus PCR Master Mix (2x)
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