中文名:膜回收緩沖液
英文名:Stripping Buffered Solution
純度:1×
貨號:S301877
包裝:500ml
存儲溫度:2-8°C儲存
產(chǎn)品介紹:
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膜回收緩沖液(Stripping Buffered Solution for Western Blots)可以對印記膜進(jìn)行抗體洗脫從而達(dá)到Western Blot多次檢測的目的。在37℃條件下,將用過的膜浸泡在膜再生液5-15分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進(jìn)行新一輪Western Blot實(shí)驗(yàn)。即使樣品量并不匱乏,采用這一策略多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差。適用于清除硝酸纖維素膜或PVDF膜上結(jié)合的抗體。
使用方法:
1.將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中,37℃洗脫5-15分鐘,時間長短應(yīng)該參考注意事項(xiàng)進(jìn)行優(yōu)化。
2.取出膜,用TTBS,TBST,PBST等洗滌緩沖液漂洗至少5次,每次5-10min。
3.此時膜上抗體已除去,可重新封閉后再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。
4.膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來,實(shí)際操作中,膜類型,抗體類型,濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
5.適用于ECL和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western檢測,例如 DAB,NBT/BCIP。
6.用ECL顯色后,再生液洗脫幾分鐘后,可再次加入ECL顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除凈,須進(jìn)一步在再生液中浸泡至膠片上無顯色。
7.使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA封閉的膜更容易再生。8.不可讓膜干燥。
使用范圍:
適用于一般生物學(xué)及醫(yī)學(xué)研究
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