中文名：DNase I
英文名：DNase I
純度：醫(yī)藥級
貨號：D406460
包裝：400u
存儲溫度：-20°C儲存
產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品描述
在mRNA大規(guī)模生產(chǎn)過程中，轉(zhuǎn)錄結(jié)束后需要對轉(zhuǎn)錄模板進行去除，DNase I 可以將單鏈或者雙鏈 DNA 進行同等程度的隨機分解，生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。在Mg2+條件下，DNase I可以對雙鏈DNA進行隨意剪切。
DNase I（Deoxyribonuclease I，脫氧核糖核酸酶 I）最初分離自牛胰臟，分子量約為 39 kD，是一種脫氧核糖核酸內(nèi)切酶，可將單鏈或雙鏈 DNA 同等程度進行隨機分解，生成具有 5'-P 末端寡核苷酸。DNase I 水解單鏈或雙鏈 DNA，其活性非常依賴于 Ca2+水平，并能被 Mg2+或 Mn2+激活。
本制品為利用畢赤酵母大規(guī)模發(fā)酵表達的 GMP 級重組 DNase I，采用藥用規(guī)格原輔料生產(chǎn)，并嚴格控制宿主蛋白質(zhì)殘留、核酸殘留等，符合 GMP 規(guī)范的產(chǎn)品生產(chǎn)與質(zhì)量管理規(guī)程保障生產(chǎn)過程及所有原輔料可追溯。?
質(zhì)量要求
| 項目 |
標準 |
方法 |
| 外觀 |
澄明液體 |
目視檢查 |
| 可見異物 |
符合規(guī)定 |
中國藥典2020版第四部第一法燈檢法(通則0904) |
| pH值 |
7.0-8.0 |
中國藥典2020版第四部pH值測定法(通則0631) |
| 活性 |
1.8KUml-2.2KU/ml |
004質(zhì)粒DNA降解法 |
| 純度 |
≥95% |
中國藥典2020版第四部高效液相色譜法(通則0512) |
| RNA酶殘留 |
293-RNA的降解不超過10% |
2U酶與293-RNA.37°C孵育1h |
| 細菌內(nèi)毒素含量 |
≤10 EU/mg |
中國藥典2020版第四部凝膠限度試驗法(通則1143) |
| 外源性DNA殘留 |
≤100 pg/mg |
熒光定量PCR法 |
| 宿主蛋白殘留 |
≤50 ppm |
中國藥典2020版第四部菌體蛋白殘留量測定法(通則 3414) |
| 支原體檢測 |
陰性 |
支原體檢測試劑盒 |
| 重金屬殘留 |
≤10 ppm |
中國藥典2020版第四部重金屬檢查法(通則0821) |
|
遵循以下規(guī)范生產(chǎn)
1.ISO 9001:2015, certified facility。
2.《GMP 附錄-細胞治療產(chǎn)品》國家藥品監(jiān)督管理局。
3.《人用基因治療總論-中國藥典 2020》國家藥典委。
4.USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于細胞治療，基因治療和組織工程產(chǎn)品中的輔料。
5.USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing 細胞治療產(chǎn)品生產(chǎn)過程中細胞因子和生長因子。
6.Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products 用于生產(chǎn)細胞或基因治療藥物的生物來源原料。
產(chǎn)品用途
1.制備不含 DNA 的 RNA 樣品。
2.RT-PCR 反應(yīng)前 RNA 樣品中，去除基因組 DNA 等可能的 DNA 污染。
3.體外 T7，T3，SP6 等 RNA 聚合酶催化的體外轉(zhuǎn)錄后去除 DNA 模板。
4.用于足跡法（Footprinting）分析 DNA-蛋白質(zhì)相互作用。
5.與 DNA Polymerase I 一起用于切口平移。
6.二價錳離子存在條件下，使 DNA 片段化，產(chǎn)生 DNA 隨機片段文庫。
7.細胞凋亡 TUNEL 檢測中部分剪切基因組 DNA 作為陽性對照。
保存體系
10 mM Tris-HCl (pH7.6); 2 mM CaCl2; 50% (v/v) Glycerol。?
注意事項
1.最適 pH：7.0-8.0
2.活化劑：DNase I 需要二價陽離子以達到最大活性。
3.抑制劑：EDTA, EGTA, SDS。
4.特異性：降解 DNA 的雙鏈特異性的核酸內(nèi)切酶。
5.使用時將酶置于冰上操作，使用完畢后-20℃保存。
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關(guān)鍵字： DNase I;DNase I
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