中文名:SafeRed 核酸染料
英文名:SafeRed nucleic acid gel stain
純度:10000x in H2O
貨號(hào):C301864
包裝:1ml、2ml
存儲(chǔ)溫度:2-8°C儲(chǔ)存,避光
產(chǎn)品介紹:
不致突變/超靈敏/超穩(wěn)定的SafeRed為第三代無(wú)毒的熒光核酸染料,SafeRed與Super GelRed一樣也是一種油性大分子(分子量>1000),完全改善了國(guó)內(nèi)外同類(lèi)產(chǎn)品對(duì)大片段DNA條帶拖尾模糊的現(xiàn)象,電泳效果超越第一代無(wú)毒核酸染料DuRed和第二代無(wú)毒核酸染料Super GelRed。無(wú)致突變性,帶形清晰整齊, 遷移率好, 定量準(zhǔn)確, 染色均勻, 靈敏度高, 穩(wěn)定性高,分子量>1000。
SafeRed?核酸染料特點(diǎn):
1.?? 帶形清晰整齊:第三代SafeRed?和DuGreen?完全克服了原裝國(guó)內(nèi)外類(lèi)似染料分不開(kāi)大片段DNA的缺點(diǎn),條帶清晰整齊美觀。
2.?? 安全無(wú)毒:獨(dú)特油性大分子(分子量>1000)使其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,Ames-test實(shí)驗(yàn)表明,該染料的沒(méi)有EB類(lèi)似的誘變性。
3.?? 遷移率好:EB小分子很快跑出膠外,所以EB容易導(dǎo)致小DNA片段看不清,大分子SafeRed完全克服這一點(diǎn)。
4.?? 定量準(zhǔn)確:適用于核酸分子大小的確定和定量,EB對(duì)小DNA片段定量不準(zhǔn)確。
5.?? 染色均勻:整個(gè)凝膠負(fù)極端和正極端的亮度一樣。EB會(huì)導(dǎo)致膠的整體背景稍微高些,經(jīng)常出現(xiàn)陰陽(yáng)背景(膠的背景一部分亮一部分暗);長(zhǎng)時(shí)間/長(zhǎng)距離的電泳,EB信號(hào)強(qiáng)度會(huì)相應(yīng)下降, 我們的大分子SafeRed完全克服這一點(diǎn)。
6.?? 靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對(duì)核酸遷移的影響小于SYBR Green, 國(guó)外的類(lèi)似染料對(duì)大片段DNA的遷移率影響大,造成分不開(kāi)大片段DNA的缺點(diǎn)。
7.?? 穩(wěn)定性高:耐熱,可加在緩沖液里,100℃溶解凝膠,防止染色劑沒(méi)充分混勻。適用于微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠。
8.?? 耐光性強(qiáng):實(shí)驗(yàn)室的日常光線照射環(huán)境下可以常溫放置24個(gè)月以上。
9.?? 信噪比好:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低,熒光亮度是EB的十倍以上,肉眼可觀測(cè)到亮度明顯比EB強(qiáng)。
10. 操作簡(jiǎn)單:與EB用法完全一樣,在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中染料不降解;而電泳后染色過(guò)程也只需30 分鐘且無(wú)需脫色或沖洗。
11. 適用范圍廣:適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
12. 完美兼容:SafeRed兼容所有的紫外凝膠透射儀;DuGreen兼容所有的藍(lán)光儀和可見(jiàn)光儀器。SafeRed與EB有相近的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀察裝置:標(biāo)準(zhǔn)的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用和EB相同紫外凝膠透射儀,在300nm紫外光附近可得到最佳激發(fā)。
操作步驟:
一、瓊脂糖凝膠電泳染色
將SafeRed? Nucleic Acid Dye加入凝膠中
1.制膠:常規(guī)方法制備瓊脂糖凝膠, 加入原裝的SafeRed, 使其在凝膠中的終濃度為1x (例如: 制備50ml的凝膠, 加入染料5μl),輕輕搖勻后倒膠。
2.按常規(guī)方法電泳,觀測(cè)結(jié)果。
二、泡染法??
(1)按照以上常規(guī)方法進(jìn)行電泳。 用于膠回收等高濃度DNA樣品強(qiáng)烈推薦泡染法!
(2)將Red10,000×儲(chǔ)液稀釋約3300倍到0.1M NaCl溶液中制成3×染色液。
(3)將凝膠小心地放入合適的容器中(如聚丙烯容器中)緩慢加入足量的3× 染色液浸沒(méi)凝膠。室溫振蕩染色30min左右,最佳染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含1%的瓊脂糖凝膠,染色時(shí)間約30min。?
(4)用302nm激發(fā)的紫外凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。
特別提醒:如果用的是紫外成像儀,請(qǐng)選擇SafeRed;如果使用激光成像儀或在可見(jiàn)光下觀測(cè),請(qǐng)選擇DuGreen。
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