產(chǎn)品名稱:人正常肝細(xì)胞WRL68
更多細(xì)胞及培養(yǎng)信息可參考我司官網(wǎng):www.yajimall.com
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001) |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng) |
人正常肝細(xì)胞WRL68收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)
人正常肝細(xì)胞WRL68培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。
三、細(xì)胞凍存:(注:無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號:C7001)
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃
人正常肝細(xì)胞WRL68部分相關(guān)細(xì)胞如下:
YS1350 TJ905 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞TJ905
YS1351 TPC1 人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1
YS1352 TT 人甲狀腺癌細(xì)胞TT
YS1353 TU138 人喉癌細(xì)胞TU138
YS1354 TU212 人喉癌細(xì)胞TU212
YS1355 U118MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U118MG
YS1356 U20SU2OS 人成骨肉瘤細(xì)胞U20SU2OS
YS1357 U251MGTMZ 人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞U251MGTMZ
YS1358 U251MGTMZ/LUC 人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞+LUCU251MGTMZ/LUC
YS1359 U251MG 人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞U251MG
YS1360 U266B1 人骨髓瘤細(xì)胞U266B1
YS1361 U87MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87MG
YS1362 U87MG/RFP 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87MG/RFP
YS1363 U937 人淋巴瘤細(xì)胞U937
YS1364 UMUC3 人膀胱移行細(xì)胞癌UMUC3
YS1365 VCAP 人前列腺癌細(xì)胞VCAP
YS1366 WERIRB1 人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞WERIRB1
YS1367 WM115 人惡性黑色素瘤細(xì)胞WM115
YS1368 WPMY1 人正常前列腺基質(zhì)細(xì)胞WPMY1
YS1369 WRL68 人正常肝細(xì)胞WRL68
YS1370 XWLC05 人肺腺癌細(xì)胞系云南宣威XWLC05
YS1371 XWLC05/GFP 人肺腺癌細(xì)胞系+GFP云南宣威XWLC05/GFP
YS1372 Y79 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞Y79
YS1373 ZJU0430 人膽囊癌細(xì)胞系ZJU0430
YS1374 ZJU0430/LUC 人膽囊癌細(xì)胞系ZJU0430/LUC
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關(guān)鍵字: 人正常肝細(xì)胞WRL68;人正常肝細(xì)胞;WRL68;ATCC細(xì)胞;雅吉細(xì)胞庫;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時,也建立了一套集技術(shù)支持,物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系,努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶,雅吉生物的試劑盒,在國內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,深受廣大科研人員好評,先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
本公司鄭重承諾:質(zhì)量保證、供貨及時、服務(wù)周到。