產(chǎn)品名稱(chēng)：人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH460

人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH460收到后處理

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）

人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH460培養(yǎng)步驟

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司官網(wǎng)貨號(hào)：C7001）

1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH446部分相關(guān)細(xì)胞如下：

YS1227 MUM2B 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞MUM2B

YS1228 MV411 人慢性骨髓單核細(xì)胞性白血病MV411

YS1229 NALM6 人前B急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞NALM6

YS1230 NCCIT 人畸胎癌細(xì)胞NCCIT

YS1231 NCIH1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1299

YS1232 NCIH1395 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1395

YS1233 NCIH1437 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1437

YS1234 NCIH146 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH146

YS1235 NCIH157 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCIH157

YS1236 NCIH1650 人肺支氣管癌細(xì)胞/微浸潤(rùn)肺腺癌NCIH1650

YS1237 NCIH1688 人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1688

YS1238 NCIH1703 人肺癌細(xì)胞/鱗癌NCIH1703

YS1239 NCIH1944 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1944

YS1240 NCIH1975 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1975

YS1241 NCIH2009 人肺腺癌細(xì)胞NCIH2009

YS1242 NCIH2126 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞/巨細(xì)胞肺癌NCIH2126

YS1243 NCIH2228 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH2228

YS1244 NCIH226 人肺鱗癌細(xì)胞NCIH226

YS1245 NCIH23 人肺腺癌細(xì)胞NCIH23

YS1246 NCIH2452 人胸膜雙相間皮瘤細(xì)胞NCIH2452

YS1247 NCIH292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)/肺粘液表皮樣癌NCIH292

YS1248 NCIH295R 人腎上腺皮質(zhì)細(xì)腺癌細(xì)胞NCIH295R

YS1249 NCIH358 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞P53缺失NCIH358

YS1250 NCIH446 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH446

YS1251 NCIH460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH460

YS1252 NCIH520 人肺鱗癌細(xì)胞NCIH520

YS1253 NCIH524 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH524

YS1254 NCIH661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH661

YS1255 NCIH82 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH82

YS1256 NCIH929 人骨髓瘤細(xì)胞NCIH929

YS1257 NCIN87 人胃腺癌細(xì)胞NCIN87

YS1258 NCIN87/LUC 人胃腺癌細(xì)胞NCIN87/LUC

YS1259 ncm460 人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞ncm460

YS1260 NK92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92

YS1261 NK92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK92MI

YS1262 NOZ 人膽囊癌細(xì)胞NOZ

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