產(chǎn)品名稱：人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）MDAMB415
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）MDAMB415收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）MDAMB415操作步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）MDAMB415部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS1202 MDAMB231/LUC 人乳腺癌細(xì)胞+LUC（三陰性）MDAMB231/LUC
YS1203 MDAMB361 人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）MDAMB361
YS1204 MDAMB415 人乳腺癌細(xì)胞（非三陰）MDAMB415
YS1205 MDAMB435S 人黑素瘤細(xì)胞MDAMB435S
YS1206 MDAMB436 人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）MDAMB436
YS1207 MDAMB453 人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）MDAMB453
YS1208 MDAMB468 人乳腺癌細(xì)胞（三陰性）MDAMB468
YS1209 ME180 人子宮頸表皮癌細(xì)胞ME180
YS1210 MEG01 人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞MEG01
YS1211 MET5A 人膜間皮細(xì)胞MET5A
YS1212 MG63 人骨肉瘤細(xì)胞MG63
YS1213 MGC803 人胃癌細(xì)胞MGC803
YS1214 MHCC97H 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞MHCC97H
YS1215 MHCC97H/LUC 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞MHCC97H/LUC
YS1216 MHCC97L 人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞MHCC97L
YS1217 MIAPACA2 人胰腺癌細(xì)胞MIAPACA2
YS1218 MKN28 人胃腺癌細(xì)胞MKN28
YS1219 MKN45 人胃腺癌細(xì)胞MKN45
YS1220 MM1R 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞漿細(xì)胞骨髓瘤MM.1R
YS1221 MM1S 人IgA-?骨髓瘤細(xì)胞漿細(xì)胞骨髓瘤MM.1S
YS1222 MOLT4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞MOLT4
YS1223 MonoMac6 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞MonoMac6
YS1224 MRC5 人胚肺成纖維細(xì)胞MRC5
YS1225 MS751 人子宮頸表皮癌細(xì)胞MS751
YS1226 MT2 人白血病細(xì)胞MT2
YS1227 MUM2B 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞MUM2B
YS1228 MV411 人慢性骨髓單核細(xì)胞性白血病MV411
YS1229 NALM6 人前B急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞NALM6
YS1230 NCCIT 人畸胎癌細(xì)胞NCCIT
YS1231 NCIH1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1299
YS1232 NCIH1395 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1395
YS1233 NCIH1437 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1437
YS1234 NCIH146 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH146
YS1235 NCIH157 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCIH157
YS1236 NCIH1650 人肺支氣管癌細(xì)胞/微浸潤肺腺癌NCIH1650
YS1237 NCIH1688 人經(jīng)典小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1688
YS1238 NCIH1703 人肺癌細(xì)胞/鱗癌NCIH1703
YS1239 NCIH1944 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1944
YS1240 NCIH1975 人肺腺癌細(xì)胞NCIH1975
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