產(chǎn)品名稱：人小膠質(zhì)細胞HMC3
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人小膠質(zhì)細胞HMC3收到后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人小膠質(zhì)細胞HMC3培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人小膠質(zhì)細胞HMC3部分相關(guān)細胞如下：
YS1126 HFOB119 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞HFOB1.19
YS1127 HGC27 人胃癌細胞未分化癌HGC27
YS1128 HGC27YFP 人胃癌細胞黃色熒光標記HGC27YFP
YS1129 HK2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞HK2
YS1130 HKb20 人腎上皮細胞HKb20
YS1131 HL60 人早幼粒白血病細胞HL60
YS1132 HL7702 人肝細胞HL7702
YS1133 HMC3 人小膠質(zhì)細胞HMC3
YS1134 HMEC1 人包皮微血管內(nèi)皮細胞有限細胞系HMEC1
YS1135 HO8910PM 人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞HO8910PM
YS1136 HOS 人骨肉瘤細胞HOS
YS1137 HPAC 人胰腺癌細胞HPAC
YS1138 HPAFⅡ 人胰腺癌細胞HPAFⅡ
YS1139 HPASMC 人肺動脈平滑肌HPASMC
YS1140 hTERTHPNE 人胰腺導管細胞hTERTHPNE
YS1141 HS578T 人乳腺癌細胞（三陰性）HS578T
YS1142 HS683 人腦膠質(zhì)瘤細胞HS683
YS1143 HS746t 人胃腺癌細胞HS746t
YS1144 HSFSV40T 人真皮成纖維細胞（SV40轉(zhuǎn)染）（包皮，皮膚，眼瞼皮都有）HSFSV40T
YS1145 HT1080 人纖維肉瘤細胞HT1080
YS1146 HT1376 人膀胱癌細胞HT1376
YS1147 HT29 人結(jié)腸癌細胞HT29
YS1148 HTMC 人眼小梁網(wǎng)細胞HTMC
YS1149 HuCCT1 人肝內(nèi)膽管癌細胞HuCCT1
YS1150 huh6 人肝母細胞瘤細胞huh6
YS1151 huh7 人肝癌細胞huh7
YS1152 huh7(無突觸) 人肝癌細胞huh7(無突觸)
YS1153 huh7（有突觸） 人肝癌細胞huh7（有突觸）
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