中文名：Dilinoleyl DiI（細(xì)胞膜橙紅色熒光探針）

英文名：Dilinoleyl DiI (cell membrane orange red fluorescent probe)

貨號(hào)：D598345

包裝：5mg

存儲(chǔ)溫度：2-8°C儲(chǔ)存,避光

產(chǎn)品介紹：

Dilinoleyl DiI也被稱為FAST DiI，與DiI有相同的吸收和發(fā)射波長。由于Dlinoleyl DiI中含有不飽和烴鏈，使Dilinoleyl DiI比DiI在細(xì)胞膜上的橫向擴(kuò)散速度更快。正是由于其這個(gè)特性，使其廣泛應(yīng)用于神經(jīng)元組織的追蹤。 Dilinoleyl DiI染色后可進(jìn)行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他試劑）的固定，但不建議在染色后進(jìn)行透化的過程。此外，在固定透化（室溫下用0.1% TritonX-100透化）后，也可以很好地進(jìn)行質(zhì)膜染色。 以每次使用100 μL染色工作液，染色工作液濃度10 μM計(jì)算，5 mg配置為工作液大概可以用5400次。

產(chǎn)品參數(shù)：

Ex/Em (MeOH) = 549/565 nm

注意事項(xiàng)：

1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 2. Dilinoleyl DiI染色固定的細(xì)胞或組織樣品時(shí)，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進(jìn)行固定，使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。 3. 熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

應(yīng)用范圍：

細(xì)胞膜熒光染料；神經(jīng)元順行和逆行示蹤；細(xì)胞長期示蹤

使用方法：
1. 染色液制備
（1）配制儲(chǔ)液：儲(chǔ)液用無水 DMSO 或 EtOH 配制，濃度 1~10 mM。
注：未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。
（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS 或 PBS）稀釋儲(chǔ)液，配制濃度為 1~10 μM 的工作液。
注：工作液最終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來優(yōu)化。建議從推薦濃度的 10 倍范圍內(nèi)開始最優(yōu)濃度的摸索。
2. 懸浮細(xì)胞染色
（1）加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞，使其密度為 1×106/mL。
（2）37℃孵育細(xì)胞 5~20 min，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。可以 20 min 作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。
（3）孵育結(jié)束，1000~1500 rpm 離心 5 min。傾倒上清液，再次緩慢加入 37℃預(yù)熱的生長培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。
（4）重復(fù)步驟（3）兩次以上。
3. 貼壁細(xì)胞染色
（1）將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。
（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，但要使表面保持濕潤。
（3）在蓋玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。
（4）37℃孵育細(xì)胞 5~20 min，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?20 min 作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。
（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片 2~3 次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，孵育 5~10 min，然后吸干培養(yǎng)基。但要使表面保持濕潤。
4. 結(jié)果檢測
樣品可在培養(yǎng)基中進(jìn)行檢測，可通過熒光顯微鏡成像或流式細(xì)胞儀分析。?

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