酶聯(lián)免疫吸附試驗 (以下簡稱ELISA) :是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
ELISA采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。
技術(shù)優(yōu)勢
ELISA實現(xiàn)了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。
其特異性來自抗體或抗原的選擇性??乖贵w的結(jié)合實質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點之間。
樣本類型
培養(yǎng)上清,血清,血漿;腦脊液等體液;組織細胞裂解液。
應(yīng)用領(lǐng)域
①免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位
②研究抗酶抗體的組成
③閃現(xiàn)微量的免疫沉淀反響
④定量檢測體液中抗原或抗體成份
完成周期:1~2周
上海樂備實生物技術(shù)有限公司
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