中文名:葡聚糖凝膠
英文名:Dextran Gel
純度:40-120μm,分離范圍3000-120000(球蛋白)
貨號(hào):S304940
包裝:1g、25g、5g
Cas號(hào):9050-94-6
存儲(chǔ)溫度:2-8°C儲(chǔ)存
產(chǎn)品介紹:
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。親水基質(zhì)使其非特異性吸附最小化,并在生物分子分離期間得到較高的回收率。G 型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級(jí)分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。添加使用說明:以干粉形式存在,使用前必須溶脹,在膨脹期間應(yīng)避免過度攪拌,因?yàn)樗赡芷茐奶盍希灰褂么帕嚢杵鳌?br>一、 填料的準(zhǔn)備(1)將填料在過量去離子水或緩沖液中,室溫條件下膨脹 24 小時(shí),或用熱水膨脹 1?小時(shí)(不要水浴?。?。洗脫緩沖液不應(yīng)含有高粘度的試劑。溶脹過程中,如果上層有漂浮物,請(qǐng)去除。(2)將溶脹好的填料,所有的緩沖液等材料平衡至實(shí)驗(yàn)操作溫度,對(duì)所有的緩沖液進(jìn)行脫氣處理。二 裝柱(1)檢查層析柱所有部件,特別是過濾網(wǎng),密封圈,螺旋塞是否緊密,玻璃管是否干凈和完整。(2)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位,務(wù)必使底端無氣泡。(3)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。(4)打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定(注意壓力不要超過填料最大耐壓)。三 平衡上樣前平衡層析柱至少 5-10 個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的 pH 值和電導(dǎo)值等于上柱的 Buffer 的?pH 值和電導(dǎo)值)。四 上樣樣品一定要離心或過濾后(0.45um 濾膜)上樣。凝膠過濾的上樣量一般為不大于 5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在 1-2%的柱床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到 20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱子越高,分離效果相應(yīng)越好,但是,柱高過高的凝膠柱會(huì)引起較大的反壓,也應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為 5:1 即可。五 洗脫方法可以用無鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫。六 在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是用 0.1 M?氫氧化鈉洗 2?個(gè)柱體積,再以至少 10 個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。添加注意事項(xiàng):(1)上樣之前,樣品必須經(jīng)過膜過濾及去除色素,否則雜質(zhì)及色素會(huì)被吸附到填料上,影響填料的正常使用。所有的緩沖液均需要用 0.45um 的過濾器過濾。(2)在使用過程中,避免使用高濃度的強(qiáng)酸強(qiáng)堿,酸和堿的濃度應(yīng)低于 0.1 摩爾。堿會(huì)使流速變慢。(3)不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行。保存注意事項(xiàng):未處理的填料,室溫密閉保存。使用完的填料,用純水將鹽分徹底沖洗,最后保存在 20%乙醇中,4℃保存。
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