概述
這個(gè)Abraxis柱孢藻毒素ELISA檢測(cè)試劑盒,適用于定量檢測(cè)水樣中柱孢藻毒素的含量。在樣品處理的時(shí)候不需要濃縮。如果必要的話陽性樣品可以通過HPLC或其他的傳統(tǒng)的方法來驗(yàn)證。
安全性說明
底物溶液包含有TMB,終止液含有稀硫酸。要避免皮膚和底物溶液與終止液接觸。如果不小心接觸的話請(qǐng)用清水沖洗。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
這個(gè)Abraxis柱孢藻毒素ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)該置于4–8°C保存。在使用前要提前拿出來回復(fù)到室溫(20-25°C)。在有效期內(nèi)都可以使用。
原理
這個(gè)Abraxis柱孢藻毒素檢測(cè)試劑盒的原理是直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫反應(yīng)。通過一種特異性抗體來識(shí)別檢測(cè)柱孢藻毒素。當(dāng)樣品中還有柱孢藻毒素及其類似物時(shí),那么它們將會(huì)和柱孢藻毒素-HRP競(jìng)爭(zhēng)和溶液中的微囊藻素抗體結(jié)合。微囊藻素抗體與包被在微孔板底部的羊抗鼠二抗結(jié)合。經(jīng)過一個(gè)洗滌步驟后加入無色底物,產(chǎn)生了一個(gè)顏色反應(yīng)。加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色;在450nm波長進(jìn)行檢測(cè),樣品中的微囊藻素濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
試劑盒的局限性和可能的交叉反應(yīng)
對(duì)在水樣中經(jīng)常出現(xiàn)的多種有機(jī)物和無機(jī)物已近作過檢測(cè)對(duì)此試劑盒并無干擾。由于化合物的易變質(zhì)性由基質(zhì)反應(yīng)引起的干擾是不可能完全避免的。以下物質(zhì)的濃度在不高于10,000 ppm時(shí)對(duì)試劑盒檢測(cè)結(jié)果沒有影響:氧化鋁、氯化鈣、硫酸鈣、硫酸錳、硫酸鎂、氯化鎂、氯化鈉、磷酸鹽、硫代硫酸鈉。以下物質(zhì)的濃度在不高于1,000 ppm時(shí)對(duì)試劑盒檢測(cè)結(jié)果沒有影響:硝酸鈉、硫酸鋅;腐殖酸小于100 ppm對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒有影響;氯化銅小于10 ppm對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒有影響。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤,比如:試劑盒保存條件不對(duì)、錯(cuò)誤的加液順序、試劑的量沒有加準(zhǔn)確、孵育的時(shí)間太長或太短、孵育的溫度太高或太低。操作過程不易在強(qiáng)光下進(jìn)行。和其它檢測(cè)方法一樣對(duì)陽性結(jié)果要求通過其它傳統(tǒng)的方法來驗(yàn)證。
檢測(cè)柱孢藻毒素的重要性
世界上大多數(shù)人都依賴地表水,因?yàn)?/span>地表水是主要的飲用水。飲用水工業(yè)面臨著表面水污染的威脅,這將導(dǎo)致人類的安全問題。藍(lán)綠藻屬(Cyanobacteria,Blue-green Algae)分泌產(chǎn)生的藍(lán)藻毒素是目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的污染范圍最廣,研究最多的一類藻毒素。柱孢藻毒素是由幾種藍(lán)綠藻病毒株產(chǎn)生,分布于全世界的淡水中。目前一發(fā)現(xiàn)raciborskii (Australia, Hungary, United States), Umezakia natans (Japan), Aphanizomenon ovalisporum (Australia, Israel) 都產(chǎn)生柱孢藻毒素。柱孢藻毒素的產(chǎn)生有株特異性,沒有種族的特異性。有毒藍(lán)藻赤潮是導(dǎo)致人和動(dòng)物急性中毒的主要原因,有的還引發(fā)的死亡。這些毒素可以抑制肝功能的活性,這些毒素也是蛋白質(zhì)合成和谷胱甘肽的抑制劑,最后導(dǎo)致細(xì)胞死亡。人體可能通過攝入毒素污染的水或食物(魚)而中毒,或和柱孢藻毒素接觸(如發(fā)生在淋浴或洗澡、涉水,游泳,劃船,或者滑水)而中毒。為了保護(hù)消費(fèi)者的健康,世界衛(wèi)生組織已經(jīng)提出一些毒素(如飲用水和水上娛樂設(shè)施中微囊藻毒素)的限制。通過對(duì)小鼠的急性毒性研究,科學(xué)家已近計(jì)算出人每日可容忍攝入的柱孢藻毒素的量以TDI表示。0.02克/公斤體重/日。
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