魯米諾是一種化學(xué)熒光分子,在過(guò)氧化氫分子存在的條件下可以轉(zhuǎn)變成激發(fā)態(tài)氨基鄰苯二甲酸,后者發(fā)出較強(qiáng)的熒光。過(guò)氧化氫是許多生物氧化反應(yīng)的產(chǎn)物,因此很容易通過(guò)引入魯米諾將這些生物氧化反應(yīng)與光檢測(cè)聯(lián)系起來(lái)。例如用葡萄糖氧化酶/過(guò)氧化氫酶探頭能夠檢測(cè)樣品中的過(guò)氧化氫或葡萄糖的濃度,響應(yīng)時(shí)間僅0.5s(動(dòng)態(tài)法)。
將化學(xué)發(fā)光物質(zhì)與免疫學(xué)反應(yīng)結(jié)合起來(lái),用光反應(yīng)表示被測(cè)的免疫成分濃度,稱為化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)(chemiluminescenceimmuneassay,CLIA)。1976年Shmeder提出了化學(xué)發(fā)光免疫分析,以魯米諾-H202及衍生物ABEI為檢測(cè)反應(yīng)顯示系統(tǒng),目前魯米諾(luminol)及其衍生物已經(jīng)是化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定應(yīng)用中最常用的標(biāo)記物,它們?cè)趬A性條件下,通過(guò)微過(guò)氧化物酶(microperoxidase)催化,可釋放出大量光子,魯米諾可用于HRP標(biāo)記抗體的WesternBlot和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交檢測(cè),也用于現(xiàn)代刑偵血跡檢測(cè)?;瘜W(xué)發(fā)光物質(zhì)能作為化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物的化合物須具備下列條件:發(fā)光的量子產(chǎn)率高;其理化特性與所研究的體系相匹配;其發(fā)光反應(yīng)是發(fā)光物質(zhì)氧化反應(yīng)的結(jié)果;在所用的濃度范圍內(nèi)對(duì)生物體無(wú)毒。常用的幾類化學(xué)發(fā)光試劑有:吖啶酯(acridiniumester),是一種用途廣泛的化學(xué)發(fā)光示蹤物,它是一個(gè)三環(huán)的有機(jī)化合物,容易氧化,且氧化反應(yīng)無(wú)需催化劑,在430nm處釋放出光子;魯米諾和異魯米諾及其衍生物是最成熟的化學(xué)發(fā)光劑,早在1964年While就作了化學(xué)發(fā)光的研究報(bào)道,魯米諾、異魯米諾及其衍生物用于化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定已取得較理想的效果。
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