產品簡介
SYTO 9綠色熒光核酸染料(SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain),是一款優(yōu)秀的綠色熒光細胞核和染色體復染劑,能滲透進入原核和真核細胞膜。SYTO 9高親和結合DNA(以及RNA),一旦結合后呈現(xiàn)明顯增強的熒光信號,激發(fā)和發(fā)射波長分別是483nm和503nm。SYTO 9極其適合用作細菌實驗的核復染劑,因其對革蘭氏陽性菌和陰性菌的活細胞和死細胞都能染色。SYTO 9常常與碘化丙啶(PI)聯(lián)合使用,用于活/死細菌染色。
本品以DMSO儲存液形式提供,濃度為5mM。只需用合適的生理緩沖液稀釋到工作濃度進行簡單孵育即可。適用于哺乳動物細胞、革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌。
若需做雙染,可直接購買我司的SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活細菌/死細菌雙染試劑盒(貨號#FS4005-40T)。
產品特性
1) 同義名:SYTO 9 Green dye;SYTO 9綠色熒光染料;
2) 外觀:橙色溶液
3) 熒光特征:EX/Em=485/498nm(與DNA結合);EX/Em=486/501nm(與RNA結合)
熒光特征:EX/Em=485/498nm(與DNA結合);EX/Em=486/501nm(與RNA結合)
圖1. SYTOX 9與核酸結合的光譜特征。A)與DNA結合的吸收光譜;B)與RNA結合的吸收光譜;C)與DNA或RNA結合后的熒光發(fā)射光譜。
4) 滲透性:細胞通透性
染色流程
基于實驗室經驗和發(fā)表方法,建議使用廣譜的染色濃度來開展使用,并且根據自身的細胞類型和實驗體系來優(yōu)化摸索出的工作濃度(見表2)。
使用塑料管來稀釋SYTO 9染料,由于稀釋后的染料會粘附到玻璃上。總的來說,用不含磷酸鹽的緩沖液來染色能得到的結果。塑料或玻璃器皿上殘留的去污劑也有可能影響許多細胞或有機體的真實染色,導致在含或不含細胞的溶液中都能看到發(fā)明亮熒光的材料。確保用溫和去污劑來清洗玻璃器皿,用熱自來水完全沖洗干凈,最后用去離子水清洗數次。
表2. SYTOX 9染色不同細胞的建議工作濃度 |
細胞類型 | SYTOX 9濃度 | 孵育條件 |
細菌細胞 | 50 nM-20 μM | 渦旋混勻,之后孵育1-30 min |
真核細胞 | 10 nM-5 μM | 孵育10-120 min |
微陣列 (Microarrays) | 50 nM in TE buffer | 孵育5 min,清洗之后晾干 |
①離心收集細胞,用生理鹽溶液或水重懸細胞。貼壁細胞(比如:哺乳動物細胞)可能在蓋玻片上原位染色。使用表2內建議的工作濃度進行染色。初次實驗,建議在建議濃度范圍內做多個染料濃度,以確定能得到染色的工作濃度。需要注意:生長培養(yǎng)基、細胞密度、是否存在其它細胞、和其它因素都可能影響染色。
②染色的真核細胞通常顯示出彌散的細胞漿染色和細胞核染色,特別是經??吹矫髁恋暮藘刃◇w染色。由于此染料具細胞膜滲透性,且中性pH下帶凈正電荷,也有可能染線粒體?;罱湍妇鷥戎饕蔷€粒體染色。
相關產品
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
FS4000-20UL | SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) | 20μl |
FS4001-50UL | SYTO X Green Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO) | 50μl |
FS1202-10MG | Propidium Iodide 碘化丙啶(粉末) | 10mg |
FS1202-1ML | Propidium Iodide 碘化丙啶(1mg/ml溶液) | 1ml |
FS1204-10MG | DAPI 細胞核探針 | 10mg |
FS1209-5MG | Ethidium Monoazide Bromide (EMA) 疊氮溴化乙錠 | 5mg |
FS4005-40T | SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活細菌/死細菌雙染試劑盒 | 40T
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關鍵字: SYTO 9 Green;Propidium Iodide ;DAPI;SYTO X;
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