產(chǎn)品說明

本產(chǎn)品是經(jīng)過離子交換柱純化后，裝在無菌凍存管中通過真空干燥獲得的2 μg連有At3g63540 基因ORF的質(zhì)粒DNA干粉。

保存：-20 ℃

使用說明        

1、以5000 × g離心5 min；

2、打開凍存管，加入20 μL無菌水溶解DNA，并在室溫下孵育10 min；

3、短暫渦旋凍存管，然后瞬時離心 (小于5000 × g)。

4、質(zhì)粒溶液在-20℃下可穩(wěn)定保存一年，請避免反復(fù)凍融。


擴增方案

1、收到質(zhì)粒干粉后請先5000 rpm離心1 min，再加入20 μL無菌水溶解質(zhì)粒，室溫放置1 min；

2、從-80 °C冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標(biāo)記；

3、取2 μL質(zhì)粒加至100 μL感受態(tài)中，冰浴30min;

4、42 °C熱激90 s，再冰浴2 min;

5、加入900 μL無抗的LB液體培養(yǎng)基，200 rpm震蕩培養(yǎng)45 min;

6、5000 rpm離心5 min，僅留100 μL上清混勻菌體沉淀；

7、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；

8、將平板正向培養(yǎng)1 h，再倒置培養(yǎng)12 h～16 h;

9、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12 h~16 h，根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒。

注意事項

1、同一個基因的單個轉(zhuǎn)錄序列可能由于發(fā)生自然變異 (例如核苷酸多態(tài)性)而有所不同，每一種都有其自身有效的存在。

2、該克隆被工程化，但表達(dá)取決于基因的性質(zhì)。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。