N1-methyl-pseudouridine (1-Methylpseudouridine) 是一種甲基假尿苷,翻譯性能優(yōu)于 5 mC 和 5 mC/N1-methyl-pseudouridine。通過增加核糖體密度,mRNA 中的 N1-methyl-pseudouridine 以 eIF2α 依賴性和獨(dú)立機(jī)制增強(qiáng)翻譯。
體外研究:將N1-甲基假尿苷摻入mRNA可改變HEK293T細(xì)胞中的mRNA,使其產(chǎn)生的luc量高于標(biāo)準(zhǔn)luc mRNA。在Luc和GFP mRNA中加入N1-甲基假尿苷核苷修飾可部分抑制eIF2α磷酸化,從而增強(qiáng)翻譯的起始步驟。此外,含Luc mRNA的NN1甲基假尿苷的多聚體形成和生長也因延伸率的降低而增強(qiáng)。在所有體外翻譯系統(tǒng)中,將N1-甲基假尿苷摻入Luc和GFP-mRNAs可顯著增強(qiáng)翻譯。與Luc mRNA相比,N1-甲基假尿苷lucmrna與更重的多聚體相關(guān)[1]。
體內(nèi)研究:通過在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系和小鼠中提供增強(qiáng)的蛋白質(zhì)表達(dá)和降低的免疫原性,N1-甲基假尿苷結(jié)合mRNA優(yōu)于假尿苷結(jié)合mRNA[2]。N1甲基假尿苷(1-甲基假尿苷)(20μg;I.m.或I.d.途徑21天)和m5C/N1甲基假尿苷修飾mRNA在體內(nèi)的翻譯能力分別高于Ψ和m5C/Ψ修飾mRNA[2]。動(dòng)物模型:7周齡Balb/c小鼠[1]劑量:20μg給藥:I.m.或I.d.途徑21d。結(jié)果:具有較高的翻譯能力。
參考文獻(xiàn):
[1]. Svitkin YV, et al. N1-methyl-pseudouridine in mRNA enhances translation through eIF2α-dependent and independent mechanisms by increasing ribosome density. Nucleic Acids Res. 2017 Jun 2;45(10):6023-6036.
[2]. Andries O, et al. N(1)-methylpseudouridine-incorporated mRNA outperforms pseudouridine-incorporated mRNA by providing enhanced protein expression and reduced immunogenicity in mammalian cell lines and mice. J Control Release. 2015 Nov 10;217:337-44.
江蘇申基生物科技有限公司
聯(lián)系商家時(shí)請?zhí)峒癱hemicalbook,有助于交易順利完成!
申基生物