鏈脲佐菌素(STZ) ;糖尿病建模劑;Streptozocin
分子式:C8H15N3O7 分子量:265.22
物理性狀及指標(biāo):
外觀:……………………淡黃色結(jié)晶性粉末
熔點(diǎn):……………………121 °C
溶解性:…………………53 mg/mL溶于水及DMSO,不溶于乙醇。但其水溶液在室溫下極不穩(wěn)定,可在半小時(shí)后分解為氣體而揮發(fā)掉,故需現(xiàn)用現(xiàn)配。
密度:……………………1.86 g/cm3
含量:……………………≥99%
IC50:……………………半數(shù)致死劑量 (LD50) 經(jīng)口 - 大鼠 - 5,150 mg/kg
生物活性:本品為亞硝脲類抗生素,主要用于胰島細(xì)胞癌(β細(xì)胞或非β細(xì)胞癌),對(duì)類癌腫瘤、霍奇金病、結(jié)腸癌及肝癌等變有一定療效。它是一種有效的 DNA 甲基化試劑,作用于 HL60,K562 和 C1498 細(xì)胞,IC50 分別為11.7,904和1024μg/mL。實(shí)驗(yàn)室常用于糖尿病模型的復(fù)制。
用途及描述:科研試劑,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面,嚴(yán)禁用于人體。本品為Stre.achromogenes Uar.128產(chǎn)生的亞硝脲類抗生素,它與脂溶性的亞硝脲不同,在氯乙基處是一個(gè)甲基,在分子的另一端是一個(gè)氨基糖。STZ可自行分解活潑的甲基正碳離子,與DNA呈鏈間交叉連結(jié),從而使DNA烷化,但其烷化作用比其他亞硝脲類藥物弱,而其代謝產(chǎn)物甲基亞硝脲的烷化作用較其STZ強(qiáng)3~4倍。STZ在體內(nèi)可形成異氰酸鹽。從而與核酸蛋白結(jié)合,抑制DNA多聚酶活力,使受損的DNA難于修復(fù)。在進(jìn)行抗腫瘤研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn),STZ可使鼠類的血糖升高,在犬及猴可致糖尿病,且呈永久性。STZ的糖尿病作用具有種屬差異性,在豚鼠不引起,在人亦不引起。其致糖尿病機(jī)制主要是由于胰島細(xì)胞中菸酰胺腺嘌呤(DNA)含量減少,STZ分子中的葡萄糖基可使STZ進(jìn)入胰島β細(xì)胞,引起β細(xì)胞核內(nèi)形態(tài)變化,使其染色體凝集、伸長(zhǎng)和濃縮。
使用方法推薦(僅供參考)
以糖尿病模型為例,說(shuō)明STZ的使用方法。
1、配制檸檬酸緩沖液
A液:稱取檸檬酸(MW:210.14)2.1 g加入雙蒸水100 mL中配成A液;
B液:檸檬酸鈉(MW:294.10)2.94 g加入雙蒸水100 mL中配成B液。
將A、B液按一定比例混合(1:1.32也有按1:1的),測(cè)定pH值,調(diào)節(jié)pH在4.2-4.5范圍內(nèi),即是所需配制STZ的檸檬酸緩沖液。
2、注射前準(zhǔn)備
配制STZ注射液前,STZ放置于干燥滅菌瓶?jī)?nèi),外用錫紙包好,和檸檬酸緩沖液一起置于冰浴預(yù)冷,一起帶到動(dòng)物房備用。
3、配制注射液 大鼠過(guò)夜禁食后稱重。對(duì)大鼠進(jìn)行分組,以便按照分組溶解STZ。按空腹體重用檸檬酸緩沖液配制1%的STZ注射液。若后續(xù)注射操作不熟練,切忌不可一次性溶解完STZ。注意:STZ容易失活,STZ快速稱取后仍要求干燥避光,推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙。
4、注射 腹腔注射或尾靜脈注射,如果注射操作技術(shù)不熟練,應(yīng)兩組交替注射,在30分鐘內(nèi)注射完畢。注意:注射大多要求快速注射。
常見問(wèn)題
1、問(wèn):STZ粉末收到后,如何保存?答:分裝后用封口膜密封瓶口,用鋁箔紙(或錫箔,即避光)將瓶子包好,放入干燥罐里(干燥劑,即保持干燥狀態(tài)),并-20℃冷藏,可長(zhǎng)期保存。
2、問(wèn):建模前,大鼠為何要禁食?答:禁食12小時(shí)以上(一般過(guò)夜禁食,不禁水)。禁食的時(shí)間越長(zhǎng),STZ對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞力越明顯,即藥效越高。所以相對(duì)禁食時(shí)間延長(zhǎng),可以降低STZ的用量。
3、問(wèn):建模時(shí),常用STZ劑量?答:以200克鼠均重為例,Ⅰ型糖尿病模型:大鼠劑量為70~65 mg/kg;Ⅱ型糖尿病模型:高糖高脂喂養(yǎng)1~2個(gè)月的大鼠,STZ劑量在25~40 mg/kg;或參考文獻(xiàn)。本劑量?jī)H做參考。建議通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索劑量。
4、問(wèn):預(yù)實(shí)驗(yàn)非常重要嗎?答:很重要。實(shí)驗(yàn)時(shí)STZ的給藥量應(yīng)參照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來(lái)直接使用,鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時(shí)長(zhǎng)、注射選時(shí)、以及之前飼養(yǎng)過(guò)程、測(cè)糖選時(shí)等都不相同,通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定符合自己實(shí)驗(yàn)鼠的給藥計(jì)量,才是最科學(xué)的。
5、問(wèn):注射方式對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響?答:尾部注射即靜脈注射,藥物利用率較高,同比腹腔注射,可以節(jié)省藥量,缺點(diǎn)是操作起來(lái)不如腹腔注射方便。
6、問(wèn):注射時(shí),推進(jìn)速度和血糖的關(guān)系?答:推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相對(duì)的危險(xiǎn)性較低,但也不容易成模,常規(guī)操作中多要求快速注射。當(dāng)然,STZ的劑量是決定血糖高低的主要因素。
7、問(wèn):注射STZ后,鼠出現(xiàn)死亡情況,正常嗎?該如何解決?
答:正常。鼠的個(gè)體差別和空腹(低血糖)抵抗力的差異而致死亡率的不同,開始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不適應(yīng),或發(fā)生了DKA(即酮癥酸中毒)。
首先,一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導(dǎo)致死鼠)。
其次,高血糖和低血糖都會(huì)造成死鼠,避免死鼠可以通過(guò)注射胰島素或暫時(shí)補(bǔ)糖兩種途徑。途徑一:補(bǔ)胰島素法。死亡常見的原因?yàn)檠沁^(guò)高。可通過(guò)補(bǔ)一些中效胰島素(如給諾和靈n或NPH(中性魚精蛋白鋅胰島素)),每次2-3個(gè)單位,
3-5天后,大鼠死亡率通常會(huì)降低。途徑二:補(bǔ)糖法。禁食后的鼠,注射的時(shí)候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài),造模4小時(shí)后腹腔注射20%葡萄糖,可避免因注射時(shí)血糖過(guò)低死鼠。
再次,防止動(dòng)物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下,會(huì)互相撕殺、啃食同類,所以食物和飲水要供應(yīng)充足,是兩路供應(yīng)。
最后,防止感染。糖尿病大鼠尿量多,墊料潮濕,需要勤換墊料,所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染,特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血測(cè)血糖等侵入性操作前后,要注意消毒工作。如每次采血測(cè)血糖后可用
四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預(yù)防感染。
8、問(wèn):注射STZ后,模型不成功,如何處理?答:模型不達(dá)標(biāo)者,三天后補(bǔ)注STZ(以10 mg-20 mg/kg體重劑量腹腔注射),也很容易成模,或讓血糖恢復(fù)正常后再常規(guī)劑量注射;但要達(dá)到理想的效果,往往是恢復(fù)到正常狀態(tài)下重新造模。
儲(chǔ)存條件:-20℃,避光防潮密閉干燥。
運(yùn)輸條件:2~8℃運(yùn)輸。
【注意】
●STZ受潮不穩(wěn)定,如需多次稱取,要嚴(yán)格按照避免受潮的原則操作與存放。操作環(huán)境、盛裝容器、分裝工具都必須保持干燥。
●應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間敞口以防受潮,受潮后30分鐘失效,這和建模時(shí)要求其快速注射是一個(gè)道理,即其水溶液不穩(wěn)定。
●注射液僅在注射前配制,因?yàn)镾TZ水溶液極不穩(wěn)定。
●我司產(chǎn)品為非無(wú)菌包裝,若用于細(xì)胞培養(yǎng),請(qǐng)?zhí)崆白鲱A(yù)處理,除去熱原細(xì)菌,否則會(huì)導(dǎo)致染菌。
●部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息,我司不保證所提供信息的權(quán)威性,以上數(shù)據(jù)僅供參考交流研究之用。
HNMR結(jié)構(gòu)檢測(cè)
產(chǎn)品應(yīng)用效果測(cè)試
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