用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組IL-17濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人IL-17抗體包被于酶標(biāo)板上,實驗時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人IL-17會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-17抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗人IL-17抗體與結(jié)合在包被抗體上的人IL-17結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,IL-17濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中IL-17的濃度。
反應(yīng)類型 | 夾心法 |
規(guī)格 | 96T |
反應(yīng)時間 | 4.5h |
反應(yīng)性 | Human |
檢測方法 | Colormetric |
檢測范圍 | 7.81—500 pg/mL |
靈敏度 | 4.69 pg/mL |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清,血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人IL-17,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|
500 | 2.416 2.57 | 2.493 | 2.436 |
250 | 1.612 1.608 | 1.61 | 1.553 |
125 | 0.993 0.944 | 0.969 | 0.912 |
62.5 | 0.479 0.466 | 0.473 | 0.416 |
31.25 | 0.279 0.271 | 0.275 | 0.218 |
15.63 | 0.19 0.173 | 0.182 | 0.125 |
7.81 | 0.111 0.119 | 0.115 | 0.058 |
0 | 0.057 0.056 | 0.057 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) | 20.86 | 60.90 | 231.39 | 20.60 | 50.82 | 242.68 |
Standard deviation | 1.21 | 2.94 | 12.66 | 1.22 | 2.29 | 12.50 |
C V (%) | 5.80 | 4.83 | 5.47 | 5.92 | 4.51 | 5.15 |
注意事項:
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣
4、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染
6、底物請避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9、.本試劑不同批號組分不得混用。
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1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型!
關(guān)鍵字: 人白介素17A(IL-17A);人白介素17A;Human IL-17A;
湖北艾普蒂生物工程有限公司(簡稱:艾普蒂)由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗的專業(yè)技術(shù)團隊和企業(yè)管理團隊組建而成,專門從事以抗體、蛋白、細胞、化學(xué)品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
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