用途
該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組VEGFR-2/KDR濃度
檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人VEGFR-2/KDR抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人VEGFR-2/KDR會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人VEGFR-2/KDR抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素?？谷薞EGFR-2/KDR抗體與結(jié)合在包被抗體上的人VEGFR-2/KDR結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，VEGFR-2/KDR濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中VEGFR-2/KDR的濃度。
| 反應(yīng)類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應(yīng)時(shí)間 | 3.5h |
| 反應(yīng)性 | Human |
| 檢測(cè)方法 | Colormetric |
| 檢測(cè)范圍 | 78.13—5000 pg/mL |
| 靈敏度 | 46.88 pg/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測(cè)樣本中的人VEGFR-2/KDR，且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等），標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|
| 5000 | 2.539
2.571 | 2.555 | 2.488 |
| 2500 | 1.641
1.679 | 1.66 | 1.593 |
| 1250 | 1.041
1.015 | 1.028 | 0.961 |
| 625 | 0.548
0.556 | 0.552 | 0.485 |
| 312.5 | 0.275
0.247 | 0.261 | 0.194 |
| 156.25 | 0.179
0.171 | 0.175 | 0.108 |
| 78.13 | 0.117
0.127 | 0.122 | 0.055 |
| 0 | 0.063
0.070 | 0.067 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測(cè)20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測(cè)20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean
(pg/mL) | 243.80 | 712.30 | 2220.00 | 232.10 | 733.70 | 2091.00 |
Standard
deviation | 14.90 | 30.60 | 119.90 | 12.30 | 40.40 | 102.50 |
| C V (%) | 6.11 | 4.30 | 5.40 | 5.30 | 5.51 | 4.90 |
回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|
| Serum (n=8) | 91-105 | 97 |
| EDTA plasma (n=8) | 93-109 | 101 |
| Cell culture media (n=8) | 88-103 | 94 |
線性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。
|
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) |
|---|
| 1:2 | Range (%) | 90-103 | 97-113 | 97-110 |
| Average (%) | 96 | 104 | 103 |
| 1:4 | Range (%) | 95-107 | 82-95 | 98-115 |
| Average (%) | 100 | 88 | 105 |
| 1:8 | Range (%) | 97-111 | 84-98 | 96-111 |
| Average (%) | 104 | 90 | 104 |
| 1:16 | Range (%) | 97-110 | 87-101 | 92-107 |
| Average (%) | 103 | 94 | 97 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染
6、底物請(qǐng)避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)
8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9、.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
艾普蒂生物 品牌保障：
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1、高效、靈敏、特異的抗體;
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4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型!
關(guān)鍵字： 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2 VEGFR-2;人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2 ;Human VEGFR-2/KDR;
湖北艾普蒂生物工程有限公司（簡(jiǎn)稱：艾普蒂）由在國(guó)內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和企業(yè)管理團(tuán)隊(duì)組建而成，專門從事以抗體、蛋白、細(xì)胞、化學(xué)品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長(zhǎng)期聚焦于生命科學(xué)、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測(cè)等領(lǐng)域，專注于為生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。提供生命科學(xué) 試劑、供應(yīng)鏈服務(wù)等，為更多的生命科學(xué)科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細(xì)胞、組織、動(dòng)物等水平的各種研究。
致力于成長(zhǎng)為我國(guó)重要的生命科學(xué)試劑和成果轉(zhuǎn)化一體化的領(lǐng)導(dǎo)者、致力于成為中國(guó)大型的科研試劑產(chǎn)品供應(yīng)商之一。