用途
該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組MUC1濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人MUC1抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人MUC1會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人MUC1抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??谷薓UC1抗體與結(jié)合在包被抗體上的人MUC1結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,MUC1濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中MUC1的濃度。
反應(yīng)類型 | 夾心法 |
規(guī)格 | 96T |
反應(yīng)時(shí)間 | 3.5h |
反應(yīng)性 | Human |
檢測方法 | Colormetric |
檢測范圍 | 0.16—10 ng/mL |
靈敏度 | 0.10 ng/mL |
樣本體積 | 100μL |
樣本類型 | 血清,血漿或其他生物體液 |
特異性
可檢測樣本中的人MUC1,且與其它相關(guān)蛋白無明顯交叉反應(yīng)。
重復(fù)性
板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。
典型數(shù)據(jù)
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|
10 | 2.506 2.518 | 2.512 | 2.436 |
5 | 1.623 1.657 | 1.64 | 1.564 |
2.5 | 1.017 0.997 | 1.007 | 0.931 |
1.25 | 0.496 0.518 | 0.507 | 0.431 |
0.63 | 0.255 0.249 | 0.252 | 0.176 |
0.31 | 0.18 0.178 | 0.179 | 0.103 |
0.16 | 0.12 0.14 | 0.13 | 0.054 |
0 | 0.073 0.079 | 0.076 | -- |
精密度
板內(nèi)精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision |
---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (ng/mL) | 0.50 | 1.50 | 4.40 | 0.50 | 1.50 | 4.70 |
Standard deviation | 0.03 | 0.07 | 0.18 | 0.03 | 0.06 | 0.17 |
C V (%) | 6.00 | 4.67 | 4.09 | 6.00 | 4.00 | 3.62 |
回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|
Serum (n=8) | 91-104 | 96 |
EDTA plasma (n=8) | 95-109 | 100 |
Cell culture media (n=8) | 90-101 | 95 |
線性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白,做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實(shí)驗(yàn),得出回收率范圍及平均回收率。
|
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) |
---|
1:2 | Range (%) | 95-110 | 97-111 | 91-106 |
Average (%) | 102 | 104 | 99 |
1:4 | Range (%) | 93-111 | 84-97 | 91-105 |
Average (%) | 101 | 90 | 97 |
1:8 | Range (%) | 96-112 | 82-92 | 92-105 |
Average (%) | 104 | 87 | 98 |
1:16 | Range (%) | 96-110 | 86-100 | 95-109 |
Average (%) | 103 | 91 | 100 |
注意事項(xiàng):
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣
4、請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染
6、底物請(qǐng)避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理
9、.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
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1、高效、靈敏、特異的抗體;
2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
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關(guān)鍵字: 人粘蛋白1(MUC1)Elisa試劑盒;人粘蛋白1(MUC1);人粘蛋白;Human MUC1 ELISA Kit;
湖北艾普蒂生物工程有限公司(簡稱:艾普蒂)由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著十幾年從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和企業(yè)管理團(tuán)隊(duì)組建而成,專門從事以抗體、蛋白、細(xì)胞、化學(xué)品為核心的試劑產(chǎn)品研發(fā)與銷售。
我們長期聚焦于生命科學(xué)、生物醫(yī)藥、醫(yī)療診斷、分析檢測等領(lǐng)域,專注于為生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。提供生命科學(xué) 試劑、供應(yīng)鏈服務(wù)等,為更多的生命科學(xué)科研工作者提供 專業(yè)、全面、安全、快捷的產(chǎn)品和服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋 基因、蛋白、細(xì)胞、組織、動(dòng)物等水平的各種研究。
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