產(chǎn)品名稱(chēng) : SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液 (5×)
規(guī)格:5mL | 10mL | 25mL
有效期:24個(gè)月
存儲(chǔ):冰袋運(yùn)輸,-20℃保存,避免反復(fù)凍融,建議分裝凍存
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
5×SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer),是一種經(jīng)過(guò)改良的以溴酚藍(lán)為染料,5 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷完全被 SDS 掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS 還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),DTT 可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。因此,電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。可以用于常規(guī)的 SDS-PAGE 蛋白樣品的上樣。
操作步驟(僅供參考):
1. 在室溫或不超過(guò) 37℃的水浴中溶解 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液。水浴溶解后立即室溫存放,盡量避免長(zhǎng)時(shí)間置于水浴中。
2.按照每 4 μl 蛋白樣品加入 1 μl 5×SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液的比例,混合蛋白樣品和 5×SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液。
3.100℃或沸水浴加熱 3-5 分鐘,以充分變性蛋白。
4.冷卻到室溫后,直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內(nèi)即可。
5.通常電泳至藍(lán)色染料到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳。
關(guān)鍵字: SDS-PAGE蛋白加樣緩沖液;蛋白加樣緩沖液;
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