試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

【產(chǎn)品簡介】：

中文名稱：VEGF-D檢測試劑盒
       英文名稱：Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D, VEGF-D Elisa Kit
       包裝規(guī)格：液體盒裝 96T/48T
　　保存條件：2-8℃（長期不使用時，部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下）。
　　有效期：6個月
　　存儲運(yùn)輸：低溫避光，請勿重壓，輕拿輕放（現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三 至五天時間到貨。）
　　Elisa試劑盒可測種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
　　Elisa試劑盒適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床。

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解
人腦血管平滑肌細(xì)胞總RNAHBVSMC tDNA牛血紅蛋白質(zhì)量規(guī)格：BRHemoglobin

山羊皮膚成纖維樣細(xì)胞;DG-S1 胚腎細(xì)胞，AAV-293細(xì)胞 HP615細(xì)胞，615小鼠肺癌瘤株聚乙二醇10000質(zhì)量規(guī)格：分子量9,000~11,000PEG 10000

人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株;AMS2(SCF3)DL-蘋果酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDL-Malic acid

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Common magpie/Hong Kong/2256/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Tyrosine

CL-0301M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2D-組氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Histidine
615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株;L615 小鼠腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL10-脫乙酰巴卡亭質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR10-Deacetylbaccatin III

人絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞 Human維生素B1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品vitamin B1

EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維生素B1質(zhì)量規(guī)格：>99%,USPVitamin B1

人無色素睫狀上皮細(xì)胞HNPCEpiC維生素B12(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品vitamin B12

NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)10-十一炔-1-醇(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)10-Undecyn-1-ol
VEGF-D檢測試劑盒C57BL/6小鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cellsAc-YVAD-肽核酸Ac-YVAD-pNA質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

HME6細(xì)胞，人色素瘤細(xì)胞 動物雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0919β-丙內(nèi)酯(>95.0%(GC)(T))β-Propiolactone質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)

UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2DL-丙交酯(>98.0%(T))DL-Lactide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

Hut-102(人皮膚T瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY1022L-(-)-交酯(>98.0%(T))L-(-)-Lactide質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]δ-戊內(nèi)酯(>98.0%(GC))δ-Valerolactone質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。