中文名稱:潰瘍棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國(guó)產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測(cè)試劑盒 | |
型號(hào): EY00P341 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:潰瘍棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào) : EY00P341
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測(cè)樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量,計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注:待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測(cè)樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測(cè)樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL間氟-DL-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.99m-Fluoro-DL-tyrosine
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10% FBS鈣蛋白酶抑制劑I(進(jìn)口)質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國(guó)進(jìn)口Calpain Inhibitor I(ALLN)
IL36B Protein Human 重組 IL36B / IL1F8 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-丙氨酰-DL-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.97DL-Ala-DL-Ala
NCI-H2170(肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞)N-乙酰-DL-谷氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAc-DL-Glu-OH
CL-0394NCI-H2170(肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸質(zhì)量規(guī)格:>97%,混旋DL-a-Aminoadipic
潰瘍棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒琥珀(standard for GC,≥99.6%(GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.6%(GC)Diethyl succinate 英文名稱MouseangiotensionIIELISAKit小鼠血管緊張素II(ANGII)規(guī)格:96T/48T 雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
癸二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)Diethyl sebacate RNA探針聚合酶標(biāo)記試劑盒10 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)試劑盒 human hepatitis B virus,HBV preS2Ag ELISA Kit
二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.0%(GC)Docosane RabbitDihydrotestosterone,DHTELISA試劑盒雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 顆粒酶H(GZMH/CGL2/CTSGL2)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMH/CGL2/CTSGL2 ELISA Kit
二甲基亞砜(AR,>99%(GC))質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%(GC) Dimethyl sulfoxide 小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RatErythropoietin,EPOELISA試劑盒大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
莎稗1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Anilofos 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA檢測(cè)試劑盒HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit 96T/48T HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISA試劑盒人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Amberlite? IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂)質(zhì)量規(guī)格:719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂Amberlite? IRA-410 ion-exchange resin 大鼠神經(jīng)顆粒素(NG/GN)試劑盒 Rat neurogranin,NG/GN ELISA kit HumanCyclin-D3ELISAKit人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1酸二氫銨(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測(cè)定,≥99.5%)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測(cè)定,≥99.5%Ammonium phosphate monobasic 英文名稱RatCoisolELISAKit大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T 犬轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1酸二氫銨(for HPLC,≥99.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)Ammonium phosphate monobasic 活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測(cè)定試劑盒20/400 山羊球蛋白G(IgG)試劑盒 Goat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊(cè)資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營(yíng)模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥1490 |
VIP6年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
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2025-01-10 | |
¥2990 |
VIP1年
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上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2025-01-10 | |
¥3490 |
VIP6年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2025-01-10 | |
¥2899 |
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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2022-08-19 |