參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P345
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個(gè)待測樣本檢測時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815 小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL奎寧(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCQuinine

細(xì)胞名稱 種屬土耳其紅油質(zhì)量規(guī)格：BRRed oil

GDF10 Others Mouse 小鼠 GDF10 / BMP-3B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 倒千里光堿質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分Retrorsine

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP羅丹明B基(>97%,BS)質(zhì)量規(guī)格：>97%,BSRhodamine B base

GP1BB Others Rat 大鼠 GP1BB / CD42c 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 降鈣素，質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCalcitonin, human

伯氏立克次氏體柯克斯體PCR檢測試劑盒虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BRPolydatin  Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣

鎢粉（200目）(>99.8%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99.8%,BRTungsten powder  小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  Ratmaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鎢酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCTungstic (VI)   Rat myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 大鼠髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒  HumanHemolyticcompleme,HcELISA試劑盒人溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

震顫真菌(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCVerruculogen from Penicillium verruculosum  HumanChorionicGonadoophinβ,β-HCGELISAKit 人絨毛膜促性腺激素β(β-HCG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

沙利度胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Thalidomide  英文名稱RatFlt-3ELISAKit大鼠Flt-3(Flt-3)規(guī)格：96T/48T  大鼠抑瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒 ，英文名： OSMR ELISA Kit

鹽酸塞利洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定Celiprolol   抗體蛋白質(zhì)A標(biāo)記制備試劑盒3(100微克/)  人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA檢測試劑盒Humanai-Bburgdorleriaibody,BB-AbELISAKit 96T/48T

十二烷基硫酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定 dodecyl sulfate  ELISAKitPCP人前膠原C端肽酶規(guī)格：48T/96T  大鼠阿米洛利敏感通道α亞基(SCNN1A)試劑盒 Rat Amiloride-sensitive  channel subunit alpha,SCNN1A ELISA kit

鹽酸米安色林（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Mianserin   小鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒 ，英文名： BACE1 ELISA Kit  CLIAKitfoAF(Humaumorangiogenesisfactors)ELISAKit人腫瘤血管生長因子規(guī)格：48T/96T