參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:指環(huán)蟲屬通用PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P368
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應孔數(shù),一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應孔加樣示例
標準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
山羊皮膚細胞;WGS1 大鼠心肌細胞,H9c2細胞 Ca759細胞,615小鼠癌瘤株N'-Cbz-L-鳥氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Orn(Z)-OH
胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2N-乙酰-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRN-Acetyl-L-phenylalanine
HA Others H1N2 甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) L-脯氨酰胺質(zhì)量規(guī)格:0.98L-Prolinamide
CL-0334EB-3(Butt瘤細胞)5×106cells/瓶×2L-谷氨酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>99%(TLC),標準品L-Glutamic
IL1R2 Others Human IL1R2 / IL1RB / CD121b 細胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸(sigma)質(zhì)量規(guī)格:>99%,Sigma分裝L-Glutamic
指環(huán)蟲屬通用PCR檢測試劑盒核糖核酸酶A(美侖);RNase A;核糖核酸酶I質(zhì)量規(guī)格:≥50 U/mg,美侖Ribonuclease A from bovine pancreas 英文名稱RatMD2ELISAKit大鼠髓樣分化蛋白-2(MD2)規(guī)格:96T/48T 人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5‘-1酸吡哆醛,一水質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPyridoxal 5-phosphate 化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒20 兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)試劑盒 Rabbit acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏)質(zhì)量規(guī)格:>95%,羅氏進分Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH) ELISAKitVE-cad人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體規(guī)格:48T/96T 鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒 ,英文名: PSAP ELISA Kit
胰蛋白胨質(zhì)量規(guī)格:FMB GradeTryptone 小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)ELISA試劑盒 ,英文名: IQGAP2 ELISA Kit Rabbitcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒兔環(huán)1酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三尖杉寧堿(標準品)Cephalomannine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠胸腺基質(zhì)細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 ,英文名: TSLP ELISA Kit ELISAKitCyclin-D2小鼠細胞周期素D2規(guī)格:48T/96T
吉莫斯特;吉美嘧啶(標準品)Gimeracil質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品 兔子胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒rabbitInsulin,INSELISAKit 96T/48T Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3ELISAKit人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吉莫斯特;吉美嘧啶Gimeracil質(zhì)量規(guī)格:>98%,二氫嘧啶脫氫酶(DPD)抑制劑 犬2,3-二1酸甘油酸(2,3-DPG)試劑盒 Canine 2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG ELISA Kit 人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
硝酸奧昔康唑(標準品)Oxiconazole Nitrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 英文名稱HumanCoicoseroneELISAKit人皮質(zhì)同(Coicoserone)規(guī)格:96T/48T 小鼠維生素D(VD)試劑盒 Mouse Vitamin D,VD ELISA Kit
關(guān)鍵字: 指環(huán)蟲屬核酸檢測試劑盒;指環(huán)蟲屬PCR試劑盒;指環(huán)蟲屬PCR擴增試劑盒;指環(huán)蟲屬PCR熒光探針試劑盒;指環(huán)蟲屬通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務生物科技領域的科學研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
公司將始終堅持信譽立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠信服務的宗旨,不斷拼搏,開拓進取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。