參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腸出血性大腸桿菌:血清型PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P433
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量,計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個(gè)待測樣本檢測時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
鹽酸羅替戈汀Rotigotine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit小鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 ,英文名: TAFI ELISA Kit
右雷佐生鹽酸鹽;右丙亞胺鹽酸鹽Dexrazoxane HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒 ,英文名: IgG4 ELISA Kit MouseIerleukin-7,IL-7ELISA試劑盒小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SGI-1776SGI-1776;SGI1776質(zhì)量規(guī)格:>98%,Pim1抑制劑 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA檢測試劑盒RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 96T/48T ELISAKitACTH兔子促腎上腺皮質(zhì)激素規(guī)格:48T/96T
白頭翁皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)Anemoside A3質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人酶-3(PON3)試劑盒 Human Paraoxonase 3,PON3 ELISA Kit ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腸出血性大腸桿菌:血清型PCR檢測試劑盒?;萧斔咎?/span>-b-D-葡萄糖苷酸Montelukast acyl-b-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 小鼠乙醇脫氫酶7(ADH7)ELISA試劑盒 ,英文名: ADH7 ELISA Kit ELISAKitHGF豬肝細(xì)胞生長因子規(guī)格:48T/96T
孟魯司特Montelukast Ether質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA檢測試劑盒RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 96T/48T HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
孟魯司特亞砜(非對映)Montelukast Sulfoxide(Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 犬骨堿性1酸酶(BALP)試劑盒 Canine bone Alkaline Phosphatase,BALP ELISA Kit 人他克莫司(FK506)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二氫孟魯司特鈉鹽Dihydro Montelukast Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 英文名稱HumanFBELISAKit人纖維蛋白原(FB)規(guī)格:96T/48T 豬5羥色胺(5-HT)試劑盒 Pig 5-Hydroxyyptamine,5HT ELISA Kit
人巨泌乳素試劑盒 Human Macroprolactin ELISA Kit 14215-86-2獐牙菜苷說明書 Sweroside
Ratamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 17388-39-5獐牙菜苦苷品牌 Swertiamarin
載玻片細(xì)胞鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20 526-07-8芝麻林素規(guī)格 Sesamolin
MouseactivatedproteinC,APCELISA試劑盒小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 607-80-7芝麻素廠家 Sesamin
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5AC ELISA Kit 41059-79-4知母皂苷AⅢ說明書 Timosaponin A-Ⅲ
關(guān)鍵字: 腸出血性大腸桿菌:血清型核酸檢測試劑盒;腸出血性大腸桿菌:血清型PCR試劑盒;腸出血性大腸桿菌:血清型PCR擴(kuò)增試劑盒;腸出血性大腸桿菌:血清型PCR熒光探針試;腸出血性大腸桿菌:血清型通用型PCR試劑;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運(yùn)輸能力。
公司將始終堅(jiān)持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。