中文名稱:同馬皰疹病毒型馬交媾疹病病毒PCR檢測試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 | |
型號: EY00P448 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:同馬皰疹病毒型馬交媾疹病病毒PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P448
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標(biāo)準曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
腦血管周細胞cDNAHBVP cDNA2-脫氧-D-核糖質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2-Deoxy-D-Ribose
B16細胞,小鼠色素瘤細胞 小細胞肺癌細胞,LTEP-sm細胞 角膜內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-半乳糖(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品D-Galactose
犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgRD-半乳糖質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRD-Galactose
PLAT Others Human PLAT / tPA 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸肼;雙鹽酸肼質(zhì)量規(guī)格:>98%Hydrazine di
CL-0191RBE(膽管癌細胞)5×106cells/瓶×24A分子篩(80-100目,氣相、液相色譜柱)質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱Molecular sieves, 4 ?
同馬皰疹病毒型馬交媾疹病病毒PCR檢測試劑盒葛根素(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Puerarin Ratbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 游離脂肪酸含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
葛根素質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BRPuerarin 小鼠B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)ELISA試劑盒 ,英文名: IκBKβ ELISA Kit RatprocollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苷松新酮(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Nardosinone 人骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測試劑盒Humanbonesialoprotein,BSPELISAKit 96T/48T HumaniactParathormone,i-PTHELISA試劑盒人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
白花前胡乙素(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Praeruptorin B 大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)試劑盒 Rat Calprotectin,CALP ELISA kit Humanmicroansferrinuria,MTFELISAKit人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人參皂苷Rb3(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Ginsenoside Rb3 英文名稱CollagenIVIV型膠原規(guī)格:96T/48T 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 ,英文名: VWF ELISA Kit
人參皂苷Rc(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Ginsenoside Rc 1酸二酯酶1B(Phosphodiesterase1B)0.25單位 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA檢測試劑盒HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 96T/48T
人參皂苷Rd(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Ginsenoside Rd ELISAKitTCCC5b-9人末端補體復(fù)合物C5b-9規(guī)格:48T/96T 大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)試劑盒 Rat GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit
人參二醇(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準品Panaxadiol 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitforsLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受體規(guī)格:48T/96T
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
---|---|---|---|---|
¥2990 |
VIP1年
|
上海晶風(fēng)生物科技有限公司
|
2024-12-27 | |
¥1490 |
VIP6年
|
上海康朗生物科技有限公司
|
2024-12-27 | |
¥2500 |
VIP1年
|
費雪(杭州)醫(yī)學(xué)研究有限公司
|
2024-12-19 | |
¥2899 |
上海撫生實業(yè)有限公司
|
2022-08-19 |