參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：禽嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P543
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?/span> 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
 表皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)( 5×105 ) 少突膠質(zhì)細(xì)胞 Human雷氏曼著色劑質(zhì)量規(guī)格：BSLeishman's stain

CM-H033腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL來(lái)普霉素B 1%溶液質(zhì)量規(guī)格：>95%(HPLC),BCLeptomycin B 1% soluton

DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸氟氫可的(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量97%-103%,標(biāo)準(zhǔn)品Fludrocortisone acetate

腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC醋酸氟氫可的質(zhì)量規(guī)格：>97%Fludrocortisone acetate

HEL細(xì)胞，紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf阿折地平質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRAzelnidipine

禽嗜血桿菌PCR檢測(cè)試劑盒富馬酸福莫特羅 (二水）質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,二水合物Formoterol fumarate   人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 96T/48T  HumanCC-chemokinereceptor1,CCR1ELISA試劑盒人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

富馬酸福莫特羅(無(wú)水)質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,無(wú)水,EPFormoterol fumarate   大鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit  HumandysophinELISAKit人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

法羅培南(鈉)(2.5水)質(zhì)量規(guī)格：度>99.0%,BRFaropenem   英文名稱(chēng)RatpANCAELISAKit大鼠抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲固定)(pANCA)規(guī)格：96T/48T  牛載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定Faropenem   寄生蟲(chóng)總RNA分離試劑盒20  人左右不對(duì)稱(chēng)發(fā)育因子2(LEFTY2)試劑盒 Human left-right determination factor 2,LEFTY2 ELISA Kit

曲拉通X-114Triton X-114質(zhì)量規(guī)格：BC  小鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒 ，英文名： ANP ELISA Kit  ELISAKitDHEA-S小鼠脫氫表雄同酯規(guī)格：48T/96T

曲拉通X-405Triton X-405質(zhì)量規(guī)格：70% in H2O  小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA檢測(cè)試劑盒MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit 96T/48T  HumanBonemorphogeneticprotein2，BMP-2ELISAKit人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸CHAPS質(zhì)量規(guī)格：>98.5%  人踝蛋白(talin)試劑盒 Human talin ELISA Kit  人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CHAPSO；3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸CHAPSO質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)；  RatCoisolELISAKit大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒 Mouse Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit