參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：金黃地鼠白血病病毒PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P552
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?/span> 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
 犬腎細(xì)胞;MDCK/IgRDL-甲硫氨酸;蛋氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDL-Mine

RK3 Others Human  kC / RK3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-天冬氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98DL-Aspartic

CL-0264C918(眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDL-Glutamine

HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-beta-苯丙氨酸(>98%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRDL-beta-Phenylalanine

小鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-肉堿鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDL-Carnitine

金黃地鼠白血病病毒PCR檢測(cè)試劑盒復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.), 1-2μm(length)  ELISAKitG-CSF人粒細(xì)胞集落刺激因子規(guī)格：48T/96T  醇脫氫酶(ADH)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣

復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 5-15μm(length)  小鼠A類(lèi)清道夫受體3(SCARA3)ELISA試劑盒 ，英文名： SCARA3 ELISA Kit  RatProgesterone,PROGELISA試劑盒大鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

腐植酸，腐殖酸質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRHumic   人骨形成蛋白(BMPs)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 96T/48T  humanierferonactivatedgene205,Ifi205ELISA試劑盒人干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

光萼野百合堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Usaramine  大鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 Rat calmodulin,CAM ELISA Kit  Humanmitogen-activatedproteinkinase-activatedproteinkinase3,MAPKAPK3ELISAKit人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

慶大霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Gentamicin  人血管舒緩激肽(BK)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanBradykinin,BKELISAKit 96T/48T  humanHistocompatibility2-K1-Kregion,H2-K1ELISA試劑盒人組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

利福霉素SV（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Rifamycin   大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒 Rat Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit  HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3αELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

SL327質(zhì)量規(guī)格：>98%，MEK1/2抑制劑SL-327  CLIAKitfor人高香草酸(HVA)ELISAKit人高香草酸規(guī)格：48T/96T  大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-2 ELISA Kit

麥迪霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Midecamycin  1酸二酯酶4A(Phosphodiesterase4A)0.25單位  人腮腺炎病毒IgGELISA檢測(cè)試劑盒HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit 96T/48T