參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P557
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
盤羊皮膚細(xì)胞;OAM-S1酞菁(II)(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Lead(II) Phthalocyanine
SELL Others Mouse 小鼠 SELL / CD62L / L-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁鋅(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Zinc Phthalocyanine
CL-0015A-431(表皮癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2酞菁鐵(II)(>95.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)Iron(II) Phthalocyanine
KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酞菁二鈉質(zhì)量規(guī)格:Di Phthalocyanine
小鼠頸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸左氧氟沙星質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Levofloxacin HCl
沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒輔酶 A質(zhì)量規(guī)格:>85%,BRCoenzyme A, free , hydrate (COA) Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 可溶性1脂酶A2(sPL-A2)ELISA試劑盒 ,英文名: sPL-A2 ELISA Kit
多效唑質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPaclobutrazol 小鼠促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒 ,英文名: GH ELISA Kit RatDCspecificiercellularadhesionmolecule3-grabbingnoniegrin,DC-SIGN/CD209ELISA試劑盒大鼠樹突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集素-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)規(guī)格:96T/48T
硫酸聯(lián)氨(AR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,ARHydrazine sulfate 大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 96T/48T HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒人脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
多酚氧化酶質(zhì)量規(guī)格:>500 U/mg,BRPolyphenol Oxidase from Mushrooms 人β-轉(zhuǎn)導(dǎo)素重復(fù)序列包含蛋白(BC)試劑盒 Human BC ELISA Kit HumanGrowthHormoneBindingProtein,PELISAKit人生長激素結(jié)合蛋白(P)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氫氯噻嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Hydrochlorothiazide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱HumanCCL7ELISAKit人CCL7規(guī)格:96T/48T 人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate質(zhì)量規(guī)格:>95%,BC 二價金屬轉(zhuǎn)運體(Divalemetalanspoer1;DMTl)功能熒光檢測試劑盒20 小鼠不對稱二甲基精氨酸(ADMA)試劑盒 Mouse asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
粉(>99%,BC)Lead powder質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC ELISAKitTF人組織因子規(guī)格:48T/96T 血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒 ,英文名: ACEⅠ ELISA Kit
堿式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒 ,英文名: uPA ELISA Kit MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關(guān)鍵字: 沿岸單孢子蟲核酸檢測試劑盒;沿岸單孢子蟲PCR試劑盒;沿岸單孢子蟲PCR擴(kuò)增試劑盒;沿岸單孢子蟲PCR熒光探針試劑盒;沿岸單孢子蟲通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運輸能力。
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