參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒型PCR檢測試劑盒
型號 : EY00P602
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程:
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋, 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下:
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
輕微振蕩混勻,簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管,分別標(biāo)記為 SD1 ,SD2 ,SD3 ,SD4 ,SD5, SD6。
3,SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul CHO control DNA 加入 SD1 管中, 然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s,渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作,稀釋操作同步驟 4。
表 2. CHO control DNA 的稀釋
稀釋管 | 稀釋體積 | 濃度 |
SD1 | 2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer | 300 pg/ul |
SD2 | 20ul SD1+180ul DNA dilution buffer | 30 pg/ul |
SD3 | 20ul SD2+180ul DNA dilution buffer | 3 pg/ul |
SD4 | 20ul SD3+180ul DNA dilution buffer | 300 fg/ul |
SD5 | 20ul SD4+180ul DNA dilution buffer | 30 fg/ul |
SD6 | 20ul SD5+180ul DNA dilution buffer | 3 fg/ul |
二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO control DNA 的加樣濃度 (以制備加 45pg CHO control DNA 的樣本 ERC 為例),操作如下:
1,取待測樣本 100u,加至 1.5ml 干凈的離心管中;
2,加入 1.5ul SD2,混勻,標(biāo)記為樣本 ERC。
注:樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備
根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控,操作如下:
1,取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注:陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1,根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量,計算所需反應(yīng)孔數(shù),一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)= (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注:待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。 2,根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix:
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O= (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3,各試劑置于冰上融化,振蕩混勻,按表 3 所示進(jìn)行加樣:
表 3.各反應(yīng)孔加樣示例
標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 20ul pre-mix+ 10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6 |
NTC | 20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer |
NEG | 20ul pre-mix+ 10ul NEG |
待測樣本 | 20ul pre-mix+ 10ul 待測樣本 |
ERC 樣本 | 0ul pre-mix+ 10ul ERC 樣本 |
注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1川陳皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Nobiletin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MGC80-3細(xì)胞,胃癌細(xì)胞 喉癌細(xì)胞,TU212細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品)Toosendanin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetramethylpyrazine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RSPO1 Others Human R-Spondin 1 / RSPO1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 川芎嗪Tetramethylpyrazine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)Asperosaponin Ⅵ質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人皰疹病毒型PCR檢測試劑盒芬苯達(dá)唑;苯硫咪唑質(zhì)量規(guī)格:>99%Fenbendazole 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒RatSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T HumanAi-myocardialaibody,AMAELISA試劑盒人抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芬苯達(dá)唑;苯硫咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Fenbendazole 人表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7(EGFL7)試劑盒 Human EGFL7 ELISA kit Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CADELISAKit人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸司來吉蘭質(zhì)量規(guī)格:>98%,MAO-B selective inhibitorSelegiline HCl Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-氮雜雙環(huán)【3.3.0】辛烷鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%3-Azabicyclo (3.3.0) Octane HCL NFKAPPABP50蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25 兔血管生成素2(ANG-2)試劑盒 Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
齊多夫定Zidovudine質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP34,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 動物上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10 脂蛋白相關(guān)1脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit
齊多夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Zidovudine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatPyridinoline,PYDELISA試劑盒大鼠酚(PYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanvinculin,VCLELISA試劑盒人紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
利福霉素鈉;利福霉素SV鈉Rifamycin salt質(zhì)量規(guī)格:>900IU/mg ,BR 小鼠糖原1酸化酶L(PYGL)ELISA試劑盒 ,英文名: PYGL ELISA Kit ELISAKitCF小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96T
醋酸奧曲肽Octreotide acetate質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA檢測試劑盒Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLAELISAKit 96T/48T HumanAnnexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
關(guān)鍵字: 人皰疹病毒型核酸檢測試劑盒;人皰疹病毒型PCR試劑盒;人皰疹病毒型PCR擴(kuò)增試劑盒;人皰疹病毒型PCR熒光探針試劑盒;人皰疹病毒型通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運(yùn)輸能力。
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