參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：人類嗜淋巴細胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P615
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 大鼠表皮色素細胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸膽酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Cholesterol Palmitate

LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS正辛酸膽酯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)Cholesterol n-Octanoate

IFNA4 Protein Human 重組 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)油酸膽酯(>85.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(GC)Cholesterol Oleate

MDA-MB-175VII(導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)氯化膽(來自牛脂)(>87.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>87.0%(GC)Cholesteryl Chloride from Beef Fat

5-8F, 高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系血管緊張素 片段1-7醋酸鹽水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Angiotensin Fragment 1-7 acetate salt hydrate

人類嗜淋巴細胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒非諾貝特酸Fenofibric 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  小鼠突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒 ，英文名： STX2 ELISA Kit  ELISAKitACA-IgM小鼠抗心1脂抗體IgM規(guī)格：48T/96T

非諾貝特酸(標準品)Fenofibric 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA檢測試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 96T/48T  Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸銅五水(AR)Copper(II) sulfate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%  人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 Human Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit  人可溶性白細胞分化抗原21(CR2/sCD21)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

N-乙酰-D-氨基葡萄糖N-Acetyl-D-glucosamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  RatEsadiol,E2ELISAKit大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 Mouse Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit

普伐他汀Pravastatin質(zhì)量規(guī)格：美國進口  ELISAKitTAF人腫瘤血管生長因子規(guī)格：48T/96T  協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA試劑盒 ，英文名： CMR ELISA Kit

3-α-羥基普伐他汀內(nèi)酯3α-Hydroxy Pravastatin Lactone質(zhì)量規(guī)格：美國進口  小鼠墨蝶呤還原酶(SPR)ELISA試劑盒 ，英文名： SPR ELISA Kit  MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA試劑盒小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-α-羥基普伐他汀鈉鹽3α-Hydroxy Pravastatin  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口  人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA檢測試劑盒HumanactivatedproteinCresistance,APCRELISAKit 96T/48T  ELISAKitIgE兔子球蛋白E規(guī)格：48T/96T

(S)-3’’-羥基普伐他汀鈉鹽(S)-3’’-Hydroxy Pravastatin  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國進口  大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)試劑盒 Rat Insulin-like growth factor binding protein 5,IGFBP-5 ELISA kit  ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T