服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 規(guī)格 | 型號 |
低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR檢測試劑盒 | 50T | EY00P684 |
組成及試劑配制
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實驗外包
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
SPINK4 Others Mouse 小鼠 SPINK4 細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-D-谷氨酸質量規(guī)格:>98%,BRAc-D-Glu-OH
小鼠氣管和支氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLCBZ-D-亮氨酸質量規(guī)格:BR,>98%,油狀Z-D-Leu-OH
C2C12小鼠成肌細胞 C2C12 mouse myoblasts DMEM+10%FBSD-別異亮氨酸質量規(guī)格:0.98D-allo-Isoleucine
IL36A Protein Mouse 重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白D-纈氨醇 質量規(guī)格:>98%D-Valinol
NCI-H838(非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 A9(皮下結締組織細胞)L-苯甘氨醇 質量規(guī)格:>98%,BRL-Phenylglycinol
二氫-D-赤-鞘氨醇質量規(guī)格:美國進口Dihydro-D-erythro-Sphingosine CLIAKitforuPAELISAKit大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96T 大鼠微管關聯(lián)蛋白4(MAP4)ELISA試劑盒 ,英文名: MAP4 ELISA Kit
N-油酰-D-赤-鞘氨醇質量規(guī)格:美國進口D-erythro-Sphingosine, N-Oleoyl- 鳥氨酸脫羧酶(Ornithinedecarboxylase) The cow Niu Xiaochang alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 牛的牛小腸堿性1酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
D-赤-鞘氨醇C-20質量規(guī)格:美國進口D-erythro-Sphingosine C-20 ELISAKitVacA人空泡相關蛋白A規(guī)格:48T/96T RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
L-蘇型-鞘氨醇C-18質量規(guī)格:美國進口L-threo-Sphingosine C-18 小鼠Ⅴ型膠原α2(COL5α2)ELISA試劑盒 ,英文名: COL5α2 ELISA Kit CLIAKitforHpt/HP(RabbitHaptoglobin)ELISAKit兔結合珠蛋白/觸珠蛋白規(guī)格:48T/96T
低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR檢測試劑盒諾氟沙星(標準品)Norfloxacin質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 ELISAKitTGF-β1人轉化生長因子β1規(guī)格:48T/96T 信號傳導子及轉錄激活子6(STAT6)ELISA試劑盒 ,英文名: STAT6 ELISA Kit
諾氟沙星鹽酸鹽Norfloxacin HCl質量規(guī)格:含量大于98.5% 小鼠腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: EG-VEGF ELISA Kit MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA試劑盒小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
諾氟沙星鹽酸鹽(標準品)Norfloxacin HCl質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸(NADPH)ELISA檢測試劑盒Ratnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 96T/48T ELISAKitHA兔子透明質酸規(guī)格:48T/96T
丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽Ala-Gln 質量規(guī)格:>98%,BR 人氧化酶(DAO)試劑盒 Human diamine oxidase,DAO ELISA Kit ChickenAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
關鍵字: 低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒核酸檢測試;低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR試劑;低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR擴增;低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR熒光;低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用型PC;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質的產品,服務生物科技領域的科學研究人員。
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