服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號 |
肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒 | 50T | EY00P700 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
SGC7901細(xì)胞,胃腺癌細(xì)胞 肺扁平上皮癌細(xì)胞,QG-56細(xì)胞 BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞噻唑藍(lán);MTT質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMTT
豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3紅質(zhì)量規(guī)格:BSALLURA RED AC
ASAH2 Others Mouse 小鼠 ASAH2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亮藍(lán)質(zhì)量規(guī)格:85%,BSErioglaucine di salt
CL-0411PA-1(卵巢腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2阿立哌唑質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRAripiprazole
EFNA5 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿立哌唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Aripiprazole
二甲基亞砜(藥用級) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:藥用級 人維生素D3(VD3)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD3,VD3ELISAkit 96T/48T ELISAKitP-Selectin/CD62P小鼠P選擇素規(guī)格:48T/96T
二甲基亞砜(ACS,光譜級)Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:ACS,光譜級 大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)試劑盒 Rat iegrin alpha-2+beta-1,ITGA2+ITGB1 ELISA kit Chickehyroxine,T4ELISAKit雞甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙二醇(光譜 ,≥99%)Ethylene glycol質(zhì)量規(guī)格:光譜 ,≥99% 英文名稱HumanPIIINPELISAKit人III型前膠原肽(PIIINP)規(guī)格:96T/48T 人集落刺激因子(CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
甘油(for spectroscopy,≥99.5%)Glycerol in water for HPLC verification質(zhì)量規(guī)格:for spectroscopy,≥99.5% 動物組織同還原酶1B(aldo-ketoreductase1B)活性比色法定量檢測試劑盒20 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)試劑盒 Mouse Pulmonary Surfacta-associated protein B,SP-B ELISA kit
肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒檸檬酸鎂九水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMagnesium nonahydrate 英文名稱RatglialfibrillaryicproteinELISAKit大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit規(guī)格:96T/48T 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
十二烷基硫酸鎂(分子生物學(xué))質(zhì)量規(guī)格:>85%,分子生物學(xué)級Magnesium dodecyl sulfate 環(huán)境傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20 兔降鈣素原(PCT)試劑盒 Rabbit Procalcitonin,PCT ELISA Kit
氟化鎂(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMagnesium fluoride ELISAKitTSLP人胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96T 脯酸/谷酰胺富含性剪接因子(SFPQ)ELISA試劑盒 ,英文名: SFPQ ELISA Kit
氫氧化鎂(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRMagnesium hydroxide 小鼠骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA試劑盒 ,英文名: TNNI2 ELISA Kit RabbitLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
關(guān)鍵字: 肉芽腫性曼氏桿菌病核酸檢測試劑盒;肉芽腫性曼氏桿菌病PCR試劑盒;肉芽腫性曼氏桿菌病PCR擴(kuò)增試劑盒;肉芽腫性曼氏桿菌病PCR熒光探針試劑盒;肉芽腫性曼氏桿菌病通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對普通貨物、冷藏及冷凍倉庫的存儲、包裝及運(yùn)輸能力。
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