服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號(hào) |
反芻獸曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T | EY00P702 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
SF767細(xì)胞,腦瘤細(xì)胞 陰溝腸桿菌 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Methimazole Thio-β-D-glucuronide
RKO-E6(結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Mezlocillin
GBC-SD(膽囊癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))5×106cells/瓶×2 盤(pán)羊皮膚細(xì)胞;ASHS3二去甲基米非司酮質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Didemethyl Mifepristone
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-122-羥基米非司酮質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口22-Hydroxy Mifepristone
16. 細(xì)胞系統(tǒng)甲基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
二甲基亞砜(AR,>99%(GC)) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%(GC) 英文名稱HumanCollageypeIIELISAKit人II型膠原(CollageypeII)ELISAKit規(guī)格:96T/48T 人己糖激酶(HK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二甲基亞砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:>99.8%(GC) 動(dòng)物組織同還原酶1A(aldo-ketoreductase1A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)試劑盒 Mouse Pulmonary Surfacta-associated protein C,SP-C ELISA kit
二甲基亞砜(分子生物學(xué),≥99.9%) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué),≥99.9% 其它ELISA試劑盒 血栓素A2合成酶(TX-A2)ELISA試劑盒 ,英文名: TX-A2 ELISA Kit
二甲基亞砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格:多肽合成 小鼠前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA試劑盒 ,英文名: PCSK9 ELISA Kit MouseCompleme3,C3ELISA試劑盒小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反芻獸曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒檸檬酸二銨,檸檬酸氫二銨Ammonium , dibasic質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH)ELISA檢測(cè)試劑盒ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 96T/48T ELISAKitPⅢNP兔子Ⅲ型前膠原肽規(guī)格:48T/96T
乳酸鈣五水(>98%,USP)Calcium (L)-lactate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP 人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4(Casp4)試劑盒 human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit DuckIerleukin2,IL-2ELISAKit鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2'-脫氧胸苷-5'-一1酸二鈉鹽dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate di salt質(zhì)量規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級(jí) RatNervegrowthfactor,NGFELISAKit大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
衛(wèi)茅醇(>99%,分子生物學(xué)級(jí))Dulcitol質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí) EB病毒DNA化試劑盒20 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒 Mouse α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
關(guān)鍵字: 反芻獸曼氏桿菌核酸檢測(cè)試劑盒;反芻獸曼氏桿菌PCR試劑盒;反芻獸曼氏桿菌PCR擴(kuò)增試劑盒;反芻獸曼氏桿菌PCR熒光探針試劑盒;反芻獸曼氏桿菌通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷(xiāo)售企業(yè),公司自成立以來(lái),秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類(lèi)大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
公司具有對(duì)普通貨物、冷藏及冷凍倉(cāng)庫(kù)的存儲(chǔ)、包裝及運(yùn)輸能力。
公司將始終堅(jiān)持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量保證、誠(chéng)信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開(kāi)拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來(lái)。