服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號(hào) |
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T | EY00P711 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
S-180小鼠腹水瘤細(xì)胞 Mouse S-180 ascites tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS非洛地平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定Felodipine
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-硫鳥嘌呤(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分,Sigma A48826-TG/Thioguanine
TE-11(食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A-704(腎癌細(xì)胞)拉莫三嗪 (標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Lamotrigine
CM-M044小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLD-半乳糖醛酸質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,97%,一水D-Galacturonic
DSC2 Others Rat 大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定;一水物D-Galacturonic
二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二鈉(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein4,IGFBP-4ELISAKit人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 魚細(xì)胞色素C氧化酶(COX)試劑盒 Fish cytochrome C oxidase,COX ELISA kit
雙酚 C(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane 人胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 CLIAKitforPGE1(HumanProstaglandinE1)ELISAKit人前列腺素E規(guī)格:48T/96T
4,4'-異亞丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic 豬載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 食物比色法定量檢測(cè)試劑盒20
四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)Tetrabromobisphenol A Humanplasminogenactivator,PLGAELISAKit 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 ELISAKitcolicin人大腸菌素規(guī)格:48T/96T
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測(cè)試劑盒尿素酶,脲酶(巨豆)Urease質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進(jìn)分 人抗SSA/Ro抗體 試劑盒 Human ai-SSA/Ro aibody ELISA Kit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蛋白酶VIIIProtease type VIII質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進(jìn)口7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌 Rat15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 Porcine sICAM-1 ELISA Kit
曲安奈德Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit 人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
曲安奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)Triamcinolone Acetonide質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒雞17羥皮質(zhì)類(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISA試劑盒人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
關(guān)鍵字: 牛捻轉(zhuǎn)胃蟲核酸檢測(cè)試劑盒;牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR試劑盒;牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR擴(kuò)增試劑盒;牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR熒光探針試劑盒;牛捻轉(zhuǎn)胃蟲通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務(wù)于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員。
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