參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：禽結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P751
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 PLC/PRF/5細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 表達(dá)SV40T和EBNA1的胚腎細(xì)胞,293ET細(xì)胞 小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)長春瑞濱（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品，長期不穩(wěn)定Vinorelbine

綿羊皮膚細(xì)胞;OAR-S11酸長春瑞濱（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Vinorelbine tartrate

SERPINA1 Others Human  SerpinA1 / A1AT 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硝呋太爾質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNifuratel

CL-0023Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nifuratel

TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氧化硒(>98%,Pract Grade)質(zhì)量規(guī)格：>98%,Pract GradeSelenium (IV) oxide

禽結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒多拉司瓊質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Dolasetron  英文名稱MouseMCP-1ELISAkit小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)規(guī)格：96T/48T  大鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 ，英文名： DHEA-S ELISA Kit

多塞平N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxepin N-Oxide  冰凍切片酸性1酸酶活性染色試劑盒50  人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA檢測試劑盒HumanAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 96T/48T

多塞平鹽酸鹽-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Doxepin-d3   RatBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISA試劑盒大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 Hamster receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit

4-羥基度洛西汀-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Hydroxy Duloxetine-d6  小鼠Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： CTXⅡ ELISA Kit  CLIAKitforPYELISAKit大鼠交聯(lián)物規(guī)格：48T/96T

萘-D8(標(biāo)準(zhǔn)品)Naphthalene-d8質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品  小鼠血栓素A2(TXA2)ELISA試劑盒 ，英文名： TXA2 ELISA Kit  ELISAKitHBsAg小鼠乙型肝炎表面抗原規(guī)格：48T/96T

二十五烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC))Pentacosane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)  小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA檢測試劑盒Mouseoxytocin,OTELISAKit 96T/48T  HumanCollageypeⅡ，ColⅡELISAKit人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9,10-二甲基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)9,10-Dimethylanthracene質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品  人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒 Human maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit  人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

9,10-二苯基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)9,10-Diphenylanthracene質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品  RatCaspase-9,Casp-9ELISAKit大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 Mouse Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit