參數(shù)規(guī)格：
產品名稱：蟾分枝桿菌PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P773
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備

根據實驗設置陰性質控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注：陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)喬素（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Pinocembrin

U-937細胞，瘤細胞 前列腺癌細胞,DU-145細胞 間充質干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA延胡索甲素（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Corydaline

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥97%，標準品Dehydrocorydaline

ESAM Others Human  ESAM 細胞裂解液 (陽性對照) 小檗紅堿（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Berberrubine

小鼠肝癌瘤株;H22反式白藜蘆醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格：美國進口trans Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide

蟾分枝桿菌PCR檢測試劑盒豆甾醇質量規(guī)格：>90 %,GCStigmasterol  禽腦脊髓炎(AE)ELISA檢測試劑盒Avianencephalomyelitis,AEELISAKit 96T/48T  石蠟切片脂質過氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)熒光染色試劑盒10

豆甾醇質量規(guī)格：>90%,GCStigmasterol  人CD15分子(CD15)試劑盒 Human cluster of differeiation 15,CD15 ELISA Kit  ELISAKitBMP-7人骨成型蛋白7規(guī)格：48T/96T

硝呋烯腙鹽酸鹽質量規(guī)格：>98%,BRNitrovin HCL,Difurazone  英文名稱MouseMCP-2ELISAkit小鼠單核細胞趨化蛋白-2(MCP-2)規(guī)格：96T/48T  大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒 ，英文名： DPD ELISA Kit

杜鵑素(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Farrerol  冰凍切片蘇木素伊紅染色試劑盒50  人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA檢測試劑盒HumanFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 96T/48T

木聚糖酶Xylanase from Trichoderma viride 質量規(guī)格：BR,6萬U/G  人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA檢測試劑盒HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 96T/48T  ELISAKitOLAb兔氧化低密度脂蛋白抗體規(guī)格：48T/96T

β-Apo-土霉素β-Apo-oxytetracycline質量規(guī)格：美國進口  大鼠循環(huán)復合物(CIC)試劑盒 Rat circulating immune complex,CIC ELISA Kit  Equinegrowthhormone,GHELISAKit馬生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

α-Apo-土霉素α-Apo-oxytetracycline質量規(guī)格：美國進口  英文名稱RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠組織相容性復合物(MHC)規(guī)格：96T/48T  人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

二水合土霉素Oxytetracycline Dihydrate質量規(guī)格：美國進口  鈣離子膜通道鈣泵(F型ATP酶/線粒體、葉綠體)功能熒光檢測試劑盒20  小鼠Slit2 試劑盒 Mouse Slit2 ELISA Kit