參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：火雞出血性腸炎病毒PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P1220
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

圖

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
 HCH-c 軟骨細(xì)胞 500,000cells 表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)100克

5637, 膀胱癌細(xì)胞1-安;α-安;α-安基;1-安基 1-NcphthylcMinq;Ncphthclidinq;1-NcphthclqncMinq;α-NcphthylcMinq 134-3-7

SERPINB10 Others Mouse 小鼠 SerpinB10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CATC瓊脂100毫升

腺病毒轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞;AAV-293DL-MALICDL-蘋果酸高級白色粉末RTsigma

HCCLM3細(xì)胞，肝癌細(xì)胞 鼻咽癌細(xì)胞系,HNE2-LMP1/2細(xì)胞 CL-0354HFSF(胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×21874-62-03-乙氧基-1，2-3-ETHOXY-1,2-PROPANEDIOL

火雞出血性腸炎病毒PCR檢測試劑盒草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(0.05M)質(zhì)量規(guī)格：0.05M oxalate solution  英文名稱RatPSAELISAKit大鼠前列腺特異性抗原(PSA)規(guī)格：96T/48T  人2,3-二1酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

剛果紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)Congo red  活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性原位熒光染色檢測試劑盒20  兔白介素17(IL-17)試劑盒 Rabbit Ierleukin 17,IL-17 ELISA Kit

正癸酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Decanoic   ELISAKitADV-Ag人腺病毒抗原規(guī)格：48T/96T  凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 ，英文名： FⅫ ELISA Kit

司帕沙星質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Sparfloxacin  小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 ，英文名： IP-10/CXCL10 ELISA Kit  Rabbitnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISA試劑盒兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)Adenine sulfate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品  人核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)試劑盒 Human IKK-α ELISA kit  人卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

尿苷-5'-二1酸葡萄糖鈉鹽(UDPG)Uridine-5-diphosphoglucose di salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,Sigma  RatcytochromeP450,CYP450ELISAKit大鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠腎素(Renin)試劑盒 Mouse Renin ELISA Kit

5-鳥苷一1酸二鈉鹽(GMP)GMP質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒10  狂犬病毒核酸檢測試劑盒(熒PCR法)

腺苷-5單1酸(進口原裝) AMP 質(zhì)量規(guī)格：>99,ALFA原裝  MouseDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISA試劑盒人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T