服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 型號 |
白水河病毒PCR檢測試劑盒 | 50T | EY00P1254 |
組成及試劑配制
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實驗外包
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 細胞裂解液 (陽性對照) 雷尼替丁雜質(zhì)B質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ranitidine Impurity B
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6雷尼替丁質(zhì)量規(guī)格:美國進口Ranitidine
CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-5,6-二氯-3(4H)-喹唑啉醋酸(阿那格雷雜質(zhì)B)質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Amino-5,6-dichloro-3(4H)-quinazoline Acetic (Anagrelide Impurity B)
C26瘤 結(jié)腸癌3-羥基阿那格雷質(zhì)量規(guī)格:美國進口3-Hydroxy Anagrelide
THLE-3肝永生化細胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM培養(yǎng)基(目錄號CC3170)雷洛昔芬4'-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Raloxifene 4'-Glucuronide
丙二酸鈉 malonate質(zhì)量規(guī)格:>98% ELISAKitIL-10山羊白介素10規(guī)格:48T/96T 血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: ANG-Ⅱ ELISA Kit
1酸二氫鈉二水 phosphate, monobasic, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,分子生物學級 小鼠尿皮質(zhì)素1(UCN1)ELISA試劑盒 ,英文名: UCN1 ELISA Kit MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒小鼠游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
醋酸卡貝縮宮素,卡比托辛Carbetocin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人葉酸(FA)ELISA檢測試劑盒HumanFolic,FAELISAKit 96T/48T ELISAKitLTB4豚鼠白三烯B4規(guī)格:48T/96T
(±)-柚皮素(標準品)Naringenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>90%,標準品 大鼠游離雌三醇(FE3)試劑盒 Rat free Esiol,FE3 ELISA Kit Bacillusthuringiensis,BTELISAKit蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
白水河病毒PCR檢測試劑盒硫酸銨Ammonium sulfate質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級 Mouseβ-hexosaminidaseA,β-HexAELISA試劑盒小鼠β氨基己糖苷酶A(β-HexA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)ELISA試劑盒 ,英文名: MKK6 ELISA Kit
氯化銫Cesium chloride質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級 小鼠堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒 ,英文名: bFGF ELISA Kit Mouseβ-glucosidaseELISA試劑盒小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6α-甲基21-醋酸鹽6α-Methylprednisolone 21-Acetate質(zhì)量規(guī)格:美國進口 大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒RatEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T guineapigEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-去甲伊馬替尼-d8N-Desmethyl Imatinib-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進口 人雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)試劑盒 Human SULT1E1 ELISA Kit Humanai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
關鍵字: 白水河病毒核酸檢測試劑盒;白水河病毒PCR試劑盒;白水河病毒PCR擴增試劑盒;白水河病毒PCR熒光探針試劑盒;白水河病毒通用型PCR試劑盒;
上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑等為一體的科研產(chǎn)品銷售企業(yè),公司自成立以來,秉承""全心全意服務于科研工作者""的企業(yè)理念,立足生物科技領域,運用生物技術(shù)和科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機構(gòu)、高等院校、科研院所、企事業(yè)單位提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,服務生物科技領域的科學研究人員。
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