參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：雙埃柯病毒PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P868
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡(jiǎn)短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無(wú)模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL兩性霉素B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Amphotericin B

NP Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸增血壓素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAngiotensin Acetate

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞-處理MEF-mt鎂試劑II質(zhì)量規(guī)格：ARMagnesonII

非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6 類惡性色素瘤，A375細(xì)胞 LS 174T(結(jié)腸腺癌細(xì)胞)高鐵試劑質(zhì)量規(guī)格：AR,98.5%Ferron

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0922酚試劑(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽)質(zhì)量規(guī)格：AR,>98%3-Methyl-2-benzothialinone

雙?？虏《?/span>PCR檢測(cè)試劑盒百里香酚,麝香草酚Thymol質(zhì)量規(guī)格：AR  ELISAKitAIL-R1人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1規(guī)格：48T/96T  銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 ，英文名： APAF1 ELISA Kit

Sulfo NHS;N-羥基硫代琥珀sulfo-NHS質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  小鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： IgM ELISA Kit  MouseIerleukin15,IL-15ELISA試劑盒小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞甲蘭,亞甲基藍(lán)Methylene Blue質(zhì)量規(guī)格：BS  大鼠游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit 96T/48T  ELISAKitbFGF兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子規(guī)格：48T/96T

鹽酸沃尼妙林Valnemulin HCl質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR  人多巴胺(DA)試劑盒 human dopamine,DA ELISA KIT  ChickenLipopolysaccharides,LPSELISAKit雞脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

類葉升麻苷,毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Acteoside  ELISAKitFLU人流感病毒抗體IgG規(guī)格：48T/96T  大鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)試劑盒 Rat 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit

利卡靈-B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品(-)-Licarin B  小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒 ，英文名： DNMT1 ELISA Kit  CLIAKitforsCD30(Mousesolubleclusterofdiffereiation30)ElisaKit小鼠可溶性CD30規(guī)格：48T/96T

利血平(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Reserpine  人葡萄糖激酶(GCK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanglucokinase,GCKELISAKit 96T/48T  石蠟切片核酸氧化8-羥基鳥(niǎo)苷(8-OHG)熒光染色測(cè)定試劑盒10

酪氨酰氨質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma進(jìn)分L-Tyrosine amide  大鼠高密度脂蛋白膽(HDL-C)試劑盒 Rat High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA kit  ELISAKitMSTN人肌抑素規(guī)格：48T/96T