中文名稱(chēng):純綠青霉PCR檢測(cè)試劑盒 | 品牌: 一研 |
產(chǎn)地: 國(guó)產(chǎn) | 保存條件: -20℃ |
產(chǎn)品類(lèi)別: PCR試劑盒 PCR檢測(cè)試劑盒 | |
型號(hào): EY00P889 |
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 型號(hào) |
純綠青霉PCR檢測(cè)試劑盒 | 50T | EY00P889 |
組成及試劑配制
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
CM-M003小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL異丙基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質(zhì)I)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I)
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7 小鼠管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL乙基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物(吡羅昔康雜質(zhì) K)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Ethyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide(Piroxicam Impurity K)
腦血管平滑肌細(xì)胞 Human異丙基 4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質(zhì) L)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Isopropyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity L)
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 沙卡林N-(2-醋酸異丙基酯)(吡羅昔康雜質(zhì) F)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Saccharin N-(2-Acetic Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F)
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]甲磺酸齊拉西酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定Ziprasidone mesilate
奧沙拉秦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Olsalazine di CLIAKitfoS(Humahymidylatesyhetase)ELISAKit人胸苷酸合成酶規(guī)格:48T/96T 大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鹽酸吡格列酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Pioditazone 胚胎干細(xì)胞胰島細(xì)胞定向分化試劑盒5 人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白2(HABP2)試劑盒 Human HABP2 ELISA Kit
去氧氟尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine H2A-H2B人抗組蛋白規(guī)格:48T/96T 山梨醇含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
普羅胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查用Iopromide 小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 ,英文名: 17-OHP ELISA Kit Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
純綠青霉PCR檢測(cè)試劑盒萊苞迪甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)Rebaudioside D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95.50%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 ,英文名: A1c ELISA Kit ELISAKitbFGF-4小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4規(guī)格:48T/96T
老鸛草素(標(biāo)準(zhǔn)品)Geraniin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 96T/48T Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3ELISAKit人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酪醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Tyrosol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒 Human BMP-7 ELISA Kit 人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雷酚內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Triptophenolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKit大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒 Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit
使用方法:
一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL純水(*用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
成立日期 | 2014-06-05 (11年) | 注冊(cè)資本 | 100 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬(wàn)以?xún)?nèi) |
主營(yíng)行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),免疫安全 | 經(jīng)營(yíng)模式 | 工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱(chēng) | 價(jià)格 | 公司名稱(chēng) | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥1490 |
VIP6年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
|
2024-12-27 | |
¥2990 |
VIP1年
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上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2024-12-27 | |
¥3490 |
VIP6年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2024-12-27 |