參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P949
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
 CL-0061CHO(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2鄰苯二質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRo-Phthalaldehyde

A431細胞，表皮癌細胞系 T細胞系,H9細胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3醋酸美倫孕酮; 甲1雌醇乙酸酯質(zhì)量規(guī)格：USPMelengestrol acetate

BIU-87(膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2膽酯酶;膽甾醇酯酶質(zhì)量規(guī)格：>300 U/mg,進分Cholesterol esterase

CST5 Others Human  CST5 細胞裂解液 (陽性對照) 1,9-吡唑并蒽酮;SP600125質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進分,JNK抑制劑SP600125

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B酮麝香(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Musk ketone

普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒阿托伐他汀鈣(標準品)Atorvastatin calcium質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  The rat cellar protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA試劑盒  guineapigImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒豚鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷(進分)Azacitidine (5-Azacytidine)質(zhì)量規(guī)格：> 98%,進分,Sigma A2385  HumanElastinELISAKit 人彈性蛋白(Elastin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgGELISAKit人抗巨細胞病毒抗體IgG(ai-CMVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷Azacitidine (5-Azacytidine)質(zhì)量規(guī)格：度> 98%,BR，可用于細胞培養(yǎng)  Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISA試劑盒人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人分泌性白細胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

阿糖腺苷(標準品)Vidarabine/Ara-A質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品  脂質(zhì)過氧化物異構(gòu)前列腺素(ISOPROSTANE)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20  小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)試劑盒 Mouse α-glathione S-ansferases,α-GST ELISA Kit

卡培他濱（標準品）Capecitabine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgM)試劑盒 Bovine mycobecterium tuberculosis(MTB)aibody IgM ELISA kit  人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硫酸卷曲霉素Capreomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格：含量≥700IU/mg,BR  英文名稱HumanBonemorphogeneticproteieceptorIIELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)受體II(BMPRII)規(guī)格：96T/48T  小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)試劑盒 Mouse ai-zona pellucida aibody IgG,aZP-IgG ELISA Kit

硫酸卷曲霉素(標準品)Capreomycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格：效價測定  動物細胞/組織高質(zhì)化線粒體分離試劑盒10  載脂蛋白C1(APO-C1)ELISA試劑盒 ，英文名： APO-C1 ELISA Kit

卡馬西平Carbamazepine質(zhì)量規(guī)格：>99,BR  RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISA試劑盒大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanα-Synuclein,α-SYNELISA試劑盒人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T